Anticorpo monoclonal Anti-ATP6AP1 de coelho para WB, IHC-P, ELISA - Q15904

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de ATP6AP1

• ATP6AP1 (subunidade S1 da ATPase próton V-tipo), também conhecida como Ac45, XAP-3 ou ATP6S1, é uma subunidade acessória do complexo V0 da H+-ATPase vacuolar (V-ATPase). Esta enzima multissubunidade acopla a hidrólise de ATP pelo complexo V1 à translocação de prótons pelo complexo V0, promovendo a acidificação de compartimentos intracelulares. Referências relacionadas: PMID:28296633 PMID:33065002
• Além da acidificação, o complexo V-ATPase atua como ativador lisossomal de mTORC1, promovendo a atividade de fator de troca de nucleotídeos guanina (GEF) do complexo Ragulator, facilitando assim o recrutamento de mTORC1. Referências relacionadas: PMID:22053050
• ATP6AP1 direciona a V-ATPase para compartimentos subcelulares especializados, como vesículas secretoras neuroendócrinas e a borda ondulada de osteoclastos, regulando sua atividade. Ela também participa do tráfego de membranas e da fusão de membranas dependente de Ca²⁺. Referências relacionadas: PMID:27231034
• Em condições aeróbicas, ATP6AP1 contribui para a homeostase intracelular do ferro, o que ativada as enzimas prolil hidroxilase (PHD) dependentes de Fe²⁺, levando a hidroxilação de HIF1A e subsequentemente a sua degradação proteassomal. Referências relacionadas: PMID:28296633
• A proteína se localiza na membrana do retículo endoplasmático, no compartimento intermediário ER-Golgi e em várias vesículas citoplasmáticas, incluindo vesículas secretoras, sinápticas e revestidas de clatrina.
• É amplamente expressa, com níveis mais altos no cérebro e mais baixos no fígado e duodeno, o que é consistente com seus papéis na secreção regulada e no tráfego intracelular.
• Mutações em ATP6AP1 estão associadas a distúrbios congênitos de glicosilação (CDG), destacando sua importância no processamento de glicoproteínas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (peptídeo N-terminal, aa 1–100) tem como alvo uma região conservada em humanos e camundongos, o que suporta a reatividade cruzada. Valide em sistemas de amostras relevantes usando controles positivos (por exemplo, lisado de tecido cerebral) onde a expressão é alta.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda de aproximadamente 52 kDa. Comece com diluições padrão de IgG e otimize empiricamente. Recomenda-se um controle negativo (por exemplo, lisado de knockdown ou knockout por siRNA) para confirmar a especificidade.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), considere etapas de recuperação de antígeno e teste em seções de tecidos fixados em formalina e embebidos em parafina conhecidos por expressar ATP6AP1, como cérebro ou pâncreas.
• No ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; no entanto, o pareamento com outro clone pode melhorar a sensibilidade. Faça a titulação das concentrações do anticorpo para estabelecer a faixa dinâmica ideal.

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