Anticorpo Policlonais de Coelho Anti-ATP6V0D1 para WB, ELISA - P61421

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ATP6V0D1

• ATP6V0D1 codifica a subunidade d1 do domínio V0 da H+-ATPase vacuolar (V-ATPase), também referida como proteína acessória de 32 kDa, p39, subunidade AC39 da V-ATPase ou subunidade d 1 da bomba de prótons vacuolar.
• A V-ATPase é uma enzima multi-subunidade responsável pela acidificação de compartimentos intracelulares como lisossomos e endossomos, e em alguns tipos de células ela se localiza na membrana plasmática para acidificar o ambiente extracelular. Referências relacionadas: PMID:30374053
• O complexo V-ATPase atua como ativador de mTORC1 nas membranas lisossomais, promovendo a atividade de fator de troca de nucleotídeo guanina (GEF) do complexo Ragulator, possibilitando o recrutamento de mTORC1. Referências relacionadas: PMID:22053050
• Em condições aeróbicas, ATP6V0D1 participa da homeostase intracelular do ferro ao desencadear a atividade da Fe(2+) proil hidroxilase (PHD), o que leva à hidroxilação de HIFA1 e subsequentemente à degradação proteassômica. Referências relacionadas: PMID:28296633
• A proteína também pode contribuir para a biogênese de cílios através da regulação do transporte proteico e da localização no cílio.
• Subcelularmente, ATP6V0D1 está associada a membranas, incluindo a membrana do lisossomo e a membrana de vesículas revestidas de clatrina.
• É expressa de forma ubíqua em todos os tecidos.
• A proteína é classificada como fosfoproteína e apresenta identificação em proteômica; faz parte do proteoma de referência.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à ATP6V0D1 humana de comprimento total (aminoácidos 1–351), o que sugere que o anticorpo pode reconhecer a proteína nativa. Para Western blotting, espera-se uma banda próxima de 40 kDa; valide em lisados de humano, camundongo ou rato.
• Para ELISA, considere usar a proteína recombinante ATP6V0D1 ou lisados celulares como antígeno de revestimento e otimize a diluição do anticorpo experimentalmente.
• Dada a expressão ubíqua da V-ATPase, os níveis endógenos podem servir como controle interno, mas observe a variação potencial entre tecidos e tipos de células.
• Como o alvo contém domínios transmembrana, use métodos apropriados de preparação de amostras para evitar agregação; evite condições desnaturantes severas se o sinal for fraco.

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