Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-ATP7A para WB e ELISA - Q04656

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ATP7A

• ATP7A, também conhecida como Bomba de Cobre 1 ou proteína associada à doença de Menkes, é uma ATPase transportadora de cobre 1 codificada pelo gene ATP7A em humanos.
• Ela funciona como uma bomba de cobre (Cu⁺) dependente de ATP, crucial para a homeostase intracelular de íons de cobre, adquirindo Cu⁺ de doadores citoplasmáticos e entregando-o através das membranas. Referências relacionadas: PMID:10419525 PMID:11092760 PMID:28389643
• O ciclo catalítico acopla a hidrólise de ATP à translocação do cobre, envolvendo fosforilação transitória e uma mudança conformacional do estado voltado para dentro para o voltado para fora. Referências relacionadas: PMID:10419525 PMID:19453293 PMID:19917612
• Sob condições de baixo nível de cobre citosólico, ATP7A se localiza na rede trans-Golgi para fornecer Cu⁺ às cuproenzimas da via secretora; quando o nível de cobre aumenta, ela se realoca para a membrana plasmática para exportar o excesso de cobre. Referências relacionadas: PMID:11092760 PMID:28389643 PMID:10419525
• Em neurônios, ATP7A regula o efluxo de cobre e a transmissão sináptica, além de fornecer Cu⁺ para enzimas como PAM, TYR e SOD3, desempenhando um papel duplo na função e sobrevivência neuronal. Referências relacionadas: PMID:28389643
• Em melanossomos, ela fornece o cofator de cobre para a tirosinase (TYR) para a biossíntese de melanina.
• ATP7A é amplamente expressa, incluindo coração, cérebro, pulmão, músculo, rim e pâncreas, e em níveis mais baixos na placenta; também é encontrada em fibroblastos e células endoteliais vasculares.
• A proteína sofre splicing alternativo e está sujeita a modificações pós-traducionais como fosforilação e glicosilação, desempenhando papéis em vários compartimentos celulares, incluindo Golgi, membrana, endossomos e sinapses.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi gerado contra uma proteína de fusão recombinante correspondente à região N-terminal (aminoácidos 1-79) da ATP7A humana. Considere verificar a especificidade por análise de Western blot usando linhagens celulares ou lisados de tecidos conhecidos por expressar ATP7A.
• Para Western blot (WB), prevê-se que ATP7A corra aproximadamente a 163 kDa; no entanto, as especificações do produto indicam uma ampla faixa de 11-172 kDa, possivelmente refletindo isoformas ou produtos de degradação. Otimize a porcentagem do gel e as condições de transferência de acordo, e inclua inibidores de protease apropriados.
• Já foi comprovada a reatividade cruzada com ATP7A de rato; valide o desempenho em amostras de rato se a detecção entre espécies for desejada.
• Para aplicações de ELISA, considere testar uma faixa de diluições do anticorpo e usar controles positivos e negativos apropriados.
• Como ATP7A é uma proteína transmembrana, a escolha do tampão de lise (por exemplo, RIPA) e a preparação da amostra (com ou sem aquecimento) podem influenciar a detecção. Determine as condições ideais empiricamente.

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