Anticorpo Policlonal Anti-ATR para WB, IHC-P, ELISA - Q13535

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ATR

• ATR é uma quinase de proteína serina/treonina que reconhece a sequência consenso do substrato [ST]-Q, ativando a sinalização do ponto de verificação após danos no DNA (PubMed:10597277, PubMed:10608806, PubMed:10859164).
  Referências relacionadas: PMID:10597277, PMID:10608806, PMID:10859164

• ATR fosforila vários alvos a jusante, incluindo BRCA1, CHEK1, MCM2, RAD17, RBBP8, RPA2, SMC1 e p53/TP53, inibindo assim a replicação do DNA e a mitose enquanto promove o reparo do DNA e a apoptose (PubMed:11114888, PubMed:11418864, PubMed:11865061).
  Referências relacionadas: PMID:11114888, PMID:11418864, PMID:11865061

• Fosforila a variante de histona H2AX em Ser-139 nos locais de dano no DNA, regulando a resposta ao dano no DNA (PubMed:11673449).
  Referências relacionadas: PMID:11673449

• Necessária para a ubiquitinação do FANCD2 e crítica para a manutenção da estabilidade do sítio frágil e regulação eficiente da duplicação do centrossoma (PubMed:15314022, PubMed:12526805).
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• Atua como regulador da transição S-G2, restringindo a atividade da CDK1 durante a fase S para evitar entrada prematura na fase G2 (PubMed:30139873).
  Referências relacionadas: PMID:30139873

• Localiza-se no envelope nuclear e atua como um sensor de estresse mecânico, mediando a sinalização do ponto de verificação via fosforilação da CHEK1; também promove a ruptura do envelope nuclear em resposta a danos no DNA ao fosforilar LMNA em Ser-282 (PubMed:25083873, PubMed:37832547).
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• Envolvida na resposta inflamatória à instabilidade genômica: localiza-se em micronúcleos e fosforila LMNA em Ser-395, preparando-a para fosforilação mediada por CDK1, levando à ruptura do envelope micronuclear e ativação da via cGAS-STING e resposta de interferon tipo I (PubMed:37788673).
  Referências relacionadas: PMID:37788673

• Expressa de forma ubíqua com níveis mais altos no testículo; a isoforma 2 é encontrada no pâncreas, placenta e fígado, mas não no coração, testículo e ovário.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 400–500 do ATR humano, uma região envolvida em interações proteína-proteína; o soro policlonal pode reconhecer múltiplos epítopos dentro deste fragmento.
• Para Western blotting, espere uma banda específica em ~301 kDa; use um marcador de peso molecular grande, gel SDS-PAGE de baixa porcentagem (6%) e transferência úmida prolongada para melhorar a resolução e eficiência de transferência.
• Valide a reatividade cruzada com ATR de camundongo e rato comparando lisados de controles positivos; a identidade de sequência é alta, mas confirme com linhagens celulares ou tecidos conhecidos.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), realize recuperação antigênica (por exemplo, tampão citrato, pH 6.0) e inclua um controle sem anticorpo primário ou com peptídeo bloqueador para avaliar a especificidade da coloração.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de detecção; emparelhar com um anticorpo de captura contra um epítopo distante pode melhorar o desempenho do ensaio; valide com padrões de proteína recombinante.

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