Anticorpo policlonal de coelho anti-ATRX para IF-P e ELISA - P46100

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de ATRX

• ATRX (síndrome de alfa-talassemia/deficiência intelectual ligada ao X) é um remodelador da cromatina e regulador transcricional, também conhecido como proteína nuclear ligada ao X (XNP) ou RAD54L.
• Sua função principal envolve a atividade de translocase de DNA dependente de ATP, facilitando a deposição independente da replicação da histona H3.3 em repetições pericêntricas e telômeros, além do remodelamento de estruturas de DNA G4.
• Pertence à família de helicases SNF2/RAD54, contendo um domínio ATRX-DNMT3-DNMT3L (ADD) N-terminal, um domínio de helicase C-terminal e um motivo de dedo de zinco Znf-HX.
• A localização subcelular é predominantemente nuclear, com enriquecimento nos telômeros e nos corpos nucleares PML.
• As modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e ubiquitinação; estudos de proteômica também sugerem metilação e sumoilação (ligação isopeptídica).
• Os relatos sobre seu envolvimento na regulação de TERRA são conflitantes; em fibroblastos, ele não é suficiente para diminuir a condensação da cromatina nos telômeros nem para aumentar a expressão de RNA telomérico (PubMed:24500201). Referências relacionadas: PMID:24500201
• ATRX forma um complexo com ZNF274, TRIM28 e SETDB1 para manter H3K9me3 nos éxons 3′ dos genes de dedos de zinco, relacionando o silenciamento epigenético ao remodelamento da cromatina (PubMed:27029610). Referências relacionadas: PMID:27029610
• É expresso ubiquamente e está envolvido em diversos processos, incluindo reparo de danos ao DNA, manutenção dos telômeros por meio de ALT e regulação gênica específica de alelos em loci submetidos a imprinting.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 2273–2413, uma região próxima à extremidade C-terminal; se utilizado, certifique-se de que o anticorpo reconhece a banda esperada de aproximadamente 283 kDa em Western blot desnaturante, embora apenas IF-P e ELISA estejam listados.
• Para imunofluorescência (IF-P), utilize fixação adequada (por exemplo, PFA a 4%) e permeabilização (Triton X-100 a 0,1–0,5%) para acessar os antígenos nucleares; inclua um controle negativo sem o anticorpo primário.
• No ELISA, titule o anticorpo para otimizar a relação sinal/ruído; considere utilizar proteína ATRX recombinante ou lisados celulares de linhagens que expressem ATRX como antígenos de revestimento.
• A reatividade cruzada com camundongo é indicada; valide o desempenho em tecidos/células de camundongo se o seu sistema experimental exigir.

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