Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-AUH para WB, ELISA - Q13825

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do AUH

• O AUH codifica a metilglutaconil-CoA hidratase, uma enzima mitocondrial também conhecida como enoil-CoA hidratase de ligação ao RNA específica de AU. Desempenha um papel duplo no catabolismo da leucina e no metabolismo de RNA.
• Catalisa a hidratação do 3-metilglutaconil-CoA a 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA (HMG-CoA) na via de degradação da leucina, uma etapa chave para a produção de corpos cetônicos (PubMed:11738050, 12434311, 12655555, 16640564).
  Referências relacionadas:
  PMID:11738050 PMID:12434311 PMID:12655555 PMID:16640564
• Exibe especificidade de substrato mais ampla in vitro, incluindo glutaconil-CoA, crotonil-CoA e 3-metilcrotonil-CoA, embora com menor afinidade (PubMed:16640564).
  Referências relacionadas:
  PMID:16640564
• Liga-se a elementos ricos em AU (AREs) no mRNA, sugerindo um papel na regulação da estabilidade e decaimento do mRNA (PubMed:7892223).
  Referências relacionadas:
  PMID:7892223
• Pode funcionar como uma itaconil-CoA hidratase na via de catabolismo de dicarboxilatos C5, desintoxicando o metabólito antimicrobiano itaconato produzido por macrófagos (PubMed:29056341).
  Referências relacionadas:
  PMID:29056341
• Localiza-se predominantemente na matriz mitocondrial, consistente com suas funções metabólicas.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, e a proteína sofre splicing alternativo, adicionando diversidade funcional.
• Variantes genéticas do AUH estão associadas a doenças, destacando sua importância clínica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno usado corresponde aos aminoácidos 68–339 do AUH humano, cobrindo uma grande parte da proteína madura. Isso pode favorecer o reconhecimento de conformações nativas e desnaturadas em várias aplicações.
• Para Western blotting, espera-se uma banda em torno de 36 kDa (ou 35,6 kDa de acordo com o UniProt). Use lisatos enriquecidos em mitocôndrias ou linhagens celulares com expressão confirmada de AUH como controles positivos para verificar a especificidade da banda.
• Em ELISA, o revestimento direto com a proteína recombinante AUH ou com o fragmento imunógeno pode servir como estratégia de captura. Considere o emparelhamento com um anticorpo de detecção que reconheça um epítopo distinto para o desenvolvimento de ELISA sanduíche.
• Para confirmar a especificidade do alvo, recomenda-se o knockdown mediado por siRNA ou o knockout via CRISPR do AUH em linhagens celulares relevantes para observar a perda de sinal no WB.
>Dada a alta homologia de sequência entre o AUH humano, de camundongo e de rato, o anticorpo pode apresentar reatividade cruzada com essas espécies. Valide sempre a reatividade em amostras derivadas da espécie apropriada se estiver trabalhando com sistemas não humanos.

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