Anticorpo Policlonal Anti-B-Raf V600E para WB e ELISA - P15056

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de B-Raf

• B-Raf é uma serina/treonina-proteína quinase que atua como um transdutor essencial da via de sinalização mitogênica RAS-RAF-MEK-ERK ao fosforilar MAP2K1/MEK1 (PubMed:21441910, PubMed:29433126).
  Referências relacionadas:
  PMID:21441910, PMID:29433126
• Também fosforila PFKFB2, integrando assim a sinalização dos fatores de crescimento ao metabolismo celular da glicose (PubMed:36402789).
  Referências relacionadas:
  PMID:36402789
• B-Raf pode contribuir para a plasticidade sináptica, conforme sugerido por seu papel nas respostas pós-sinápticas dos neurônios do hipocampo (PubMed:1508179).
  Referências relacionadas:
  PMID:1508179
• A mutação V600E (uma substituição de valina por glutamato na posição 600) dentro do domínio quinase leva à atividade constitutiva da quinase e é um fator impulsionador comum nos cânceres de melanoma, colorretal e de tireoide.
• B-Raf localiza-se no núcleo, no citoplasma e na membrana celular, em concordância com seu papel na transmissão de sinais extracelulares para efetores intracelulares.
• A proteína é predominantemente expressa no cérebro e nos testículos e está sujeita a modificações regulatórias, incluindo acetilação, metilação e ubiquitinação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 507–606, incluindo o local da mutação V600E; esse desenho pode conferir especificidade ao mutante em relação ao B-Raf de tipo selvagem.
• Para Western blot, use um gel de SDS-PAGE padrão otimizado para uma proteína de aproximadamente 84 kDa e valide a detecção utilizando lisados de células que expressem B-Raf de tipo selvagem ou V600E.
• No ELISA, considere incluir o peptídeo imunizante como controle positivo para confirmar a especificidade da ligação.
• Como se trata de um anticorpo policlonal, é possível haver variabilidade entre lotes; recomendamos confirmar o desempenho de cada novo lote no seu sistema de ensaio específico.

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