Anticorpo policlonal de coelho anti-B4GALT1 para WB e ELISA - P15291

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de B4GALT1

• B4GALT1 (beta-1,4-galactosiltransferase 1) é uma enzima ligada à membrana, localizada nas pilhas do Golgi. Ela catalisa a transferência de galactose para a N-acetilglicosamina em glicolipídios e N-glicanos, sendo essencial para a síntese de N-glicanos do tipo complexo. Referências relacionadas: PMID:16157350, PMID:27872474, PMID:29133956
• A enzima adiciona especificamente galactose a ambas as antenas dos N-glicanos complexos, possibilitando a formação de glicoformas mono- e di-galactosiladas. Na imunoglobulina G (IgG), essa galactosilação é um pré-requisito para a sialilação subsequente, que confere propriedades anti-inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:27872474, PMID:29133956, PMID:36280670
• Na glândula mamária em lactação, B4GALT1 forma um complexo com a alfa-lactalbumina (LALBA) para criar a lactase sintase, alterando a preferência de substrato da N-acetilglicosamina para a glicose na produção de lactose. Referências relacionadas: PMID:16157350
• Uma forma de B4GALT1 presente na superfície celular atua como molécula de reconhecimento nas interações célula-célula e célula-matriz, como durante a fertilização, ao ligar-se aos glicanos de ZP3 na zona pelúcida e desencadear a reação acrossômica.
• Uma forma secretada possui atividade de galactosiltransferase e pode remodelar glicanos em fluidos biológicos.
• B4GALT1 é expressa ubiquamente, mas em níveis muito baixos no cérebro fetal e adulto.
• As palavras-chave do UniProt incluem: Glicoproteína, Ligação dissulfeto, Ligação ao manganês, Distúrbio congênito da glicosilação, Iniciação alternativa e Variante associada a doença.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 50–215 dentro do domínio catalítico; portanto, o anticorpo pode reconhecer tanto as formas completas quanto as formas secretadas, se presentes.
• Para Western blot, recomendam-se condições desnaturantes e redutoras devido às ligações dissulfeto; espera-se uma banda em torno de 44 kDa em lisados de tecidos humanos.
• Valide o anticorpo em controles positivos, como tecidos do fígado, rim ou placenta, onde a expressão de B4GALT1 é robusta; evite o cérebro se a baixa expressão for uma preocupação.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser utilizado como reagente de captura ou detecção; a titulação adequada do anticorpo e a concentração de revestimento do antígeno devem ser otimizadas pelo usuário final.

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