Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Bak para WB, ELISA - Q16611

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Antecedentes Biológicos: Função e Localização do Bak

• Bak (antagonista/assassino homólogo a Bcl-2), também conhecido como regulador de apoptose BAK ou Bcl2-L-7, é um membro pró-apoptótico da família de proteínas Bcl-2.
• Codificado pelo gene BAK1 (ID do Gene: 578), desempenha um papel crítico na via mitocondrial intrínseca de apoptose.
• Após estímulos apoptóticos, o Bak oligomeriza e forma poros na membrana externa mitocondrial (MOM), levando à permeabilização e libertação de fatores apoptogénicos, como o citocromo c, para o citosol.
• Esta libertação desencadeia a ativação da caspase 9 e das caspases efetoras a jusante, executando o programa de morte celular.
• O Bak localiza-se principalmente na membrana externa mitocondrial, consistente com a sua função na regulação da apoptose.
• É amplamente expresso nos tecidos humanos, com os níveis de expressão mais elevados no coração e no músculo esquelético.
• Modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e ligação de zinco, podem regular a atividade do Bak, e o splicing alternativo gera múltiplas isoformas.
• A proteína interage com fatores do hospedeiro durante a infeção viral, destacando o seu papel nas interações hospedeiro-vírus.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O anticorpo foi produzido contra um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 1-100 terminais N do Bak humano; espera-se que reconheça a proteína endógena Bak de comprimento total.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de ~23 kDa; considere o uso de frações enriquecidas em mitocôndrias ou lisados de controlo positivo de coração ou músculo esquelético, onde a expressão de Bak é mais elevada.
• Ao realizar ELISA, titule o anticorpo para determinar as concentrações ótimas de revestimento e deteção, e valide a especificidade usando proteína recombinante Bak ou ensaios de competição de peptídeos.
• A reatividade cruzada com rato é relatada; no entanto, valide no seu sistema de amostra específico, pois a deteção pode variar com o preparo da amostra e a acessibilidade do epítopo.
• Uma vez que o Bak é uma proteína da membrana mitocondrial, certifique-se de usar tampões de lise e condições de desnaturação adequados para expor o epítopo.

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