Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-BANF1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75531

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de BANF1 (Fator de Barreira à Autointegração)

• O Fator de Barreira à Autointegração (BANF1), também conhecido como proteína 1 do cluster de ponto de quebra, é uma proteína de ligação ao DNA não específica codificada pelo gene BANF1. Desempenha papéis-chave na remontagem nuclear mitótica, organização da cromatina, resposta a danos no DNA, expressão gênica e imunidade intrínseca contra DNA estranho. Referências relacionadas: PMID:10908652, PMID:11792822, PMID:12163470

• Contém dois sítios de ligação não específicos a DNA de fita dupla (dsDNA) que promovem a ponte de DNA, essenciais para suas funções arquitetônicas na cromatina. Referências relacionadas: PMID:9465049

• Na saída mitótica, o BANF1 direciona a reformação da membrana nuclear, fazendo ponte transitoriamente entre os cromossomos anafásicos, formando uma rede de cromatina densa que restringe as membranas à superfície do cromossomo. Referências relacionadas: PMID:28841419

• Regula negativamente a ativação imune inata ao competir com o CGAS pela ligação ao DNA após a perda da integridade da membrana nuclear, prevenindo assim respostas autoinflamatórias mediadas pelo CGAS. Referências relacionadas: PMID:32792394

• Na resposta a danos no DNA, o BANF1 interage com a PARP1 sob estresse oxidativo, inibindo a atividade ADP-ribosiltransferase da PARP1. Além disso, reconhece dsDNA exógeno no citosol imediatamente após a quebra do endossomo para prevenir a autofagia e, na infecção por poxvírus, bloqueia a replicação do DNA viral. Referências relacionadas: PMID:31796734, PMID:25991860, PMID:18005698

• Os retrovírus exploram o BANF1 para inibir a autointegração, promovendo a integração do DNA viral no genoma do hospedeiro. Tanto o BAF quanto a emerina (EMD) servem como cofatores para a infecção pelo HIV-1. Referências relacionadas: PMID:11005805, PMID:16680152, PMID:9465049

• O BANF1 localiza-se no núcleo, cromossomos, envelope nuclear e citoplasma. É amplamente expresso em tecidos, incluindo cólon, cérebro, coração, rim, fígado, pulmão, ovário, pâncreas, placenta, próstata, músculo esquelético, intestino delgado, baço e testículo, mas está ausente no timo e nos leucócitos do sangue periférico.

• A proteína sofre acetilação e fosforilação, e mutações estão ligadas à síndrome de progéria de Nestor-Guillermo (NGPS) e à osteoporose.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Como um anticorpo monoclonal de coelho, este clone anti-BANF1 fornece especificidade consistente e baixo fundo em ensaios imuno. Para Western blot, espera-se uma banda de ~10 kDa; garanta o uso de um gel de alta porcentagem (ex: 15%) e otimize as condições de transferência para proteínas pequenas.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), pode ser necessário recuperação antigênica (ex: recuperação de epítopo induzida por calor em tampão citrato pH 6.0); valide no sistema de tecido relevante.
• Em imunofluorescência (IF/ICC), recomenda-se permeabilização com Triton X-100 ou similar para permitir o acesso do anticorpo aos antígenos nucleares.
• Para ELISA, este anticorpo pode servir como reagente de captura ou detecção; realize experimentos de pareamento para confirmar a compatibilidade com seu antígeno.
• Controles positivos: lisados celulares de HeLa, HEK293 (humano), NIH/3T3 (camundongo) ou NRK (rato).
• Dada a reatividade cruzada com camundongo e rato, é adequado para estudos em organismos modelo; no entanto, os níveis de expressão da proteína alvo e a conservação do epítopo devem ser confirmados.
• Armazene a -20°C ao receber; evite ciclos repetidos de congelamento-descongelamento para manter a atividade.

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