Anticorpo Policlonal Anti-Bax de Coelho (Validado por KO) para Pesquisa em Apoptose - Q07812

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Bax

• Bax é um regulador central da apoptose que impulsiona a permeabilização da membrana mitocondrial externa. Sob estresse celular, sofre uma mudança conformacional, transloca para a membrana mitocondrial externa e desencadeia a libertação de citocromo c, o que ativa a caspase-3 e a apoptose subsequente. Referências relacionadas: PMID:10772918 PMID:11060313 PMID:16113678
• Sob condições normais, o Bax é mantido num estado inativo, maioritariamente no citosol, através da retrotranslocação constante das mitocôndrias para o citosol mediada pela BCL2L1/Bcl-xL, impedindo o acúmulo tóxico nas mitocôndrias. Referências relacionadas: PMID:21458670
• O Bax é expresso numa grande variedade de tecidos. Múltiplos isoformas são gerados por splicing alternativo: a isoforma Psi é encontrada em tumores gliais; a isoforma Alpha é expressa no baço, mama, ovário, testículo, cólon e cérebro, com baixos níveis na pele e pulmão; a isoforma Sigma mostra uma distribuição tecidual semelhante e também está presente em muitas linhas celulares cancerígenas.
• Subcelularmente, o Bax localiza-se na membrana externa da mitocôndria, no citoplasma e no núcleo, com a sua distribuição a alterar-se em resposta a sinais apoptóticos.
• Modificações pós-traducionais como acetilação, conjugação Ubl e formação de ligações isopeptídicas podem modular a atividade e estabilidade do Bax.
• O Bax é classificado como um supressor tumoral e tem sido implicado em interações hospedeiro-vírus.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde à região N-terminal (aminoácidos 1–100) do Bax humano, que é altamente conservada entre humano, camundongo e rato, provavelmente contribuindo para a reatividade cruzada observada. Ao validar no seu sistema modelo, confirme a especificidade através de controlos de knockdown ou knockout.
• Para western blot (WB), espere uma banda a ~21 kDa. Utilize condições redutoras e controlos de carga apropriados; considere que múltiplas isoformas podem produzir bandas adicionais.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), os métodos de recuperação de antigénio e fixação podem influenciar a deteção dos pools de Bax citosólicos versus mitocondriais. Experiências piloto são aconselhadas para otimizar as condições.
• Este anticorpo policlonal pode ser adequado para imunoprecipitação (IP) e ELISA. Para ELISA, o péptido imunogénio pode servir como padrão para quantificação.

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