Anticorpo Policlonal Anti-Bcl-2 para WB, IP, ELISA - P49950

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Bcl-2

• Bcl-2, codificado pelo gene Bcl2, é uma proteína antiapoptótica chave que suprime a morte celular programada em vários sistemas celulares, incluindo células linfo-hematopoiéticas dependentes de fatores e células neurais.
• Regula a morte celular controlando a permeabilidade da membrana mitocondrial, funcionando em um ciclo de feedback com caspases. Inibe a atividade das caspases, seja impedindo a liberação de citocromo c das mitocôndrias ou ligando-se ao fator ativador de apoptose APAF-1.
• Além da apoptose, o Bcl-2 atua como um inibidor da autofagia: interage com BECN1 e AMBRA1 em condições de não privação para suprimir a função autofágica.
• Também pode atenuar a inflamação, prejudicando a ativação do inflamassoma NLRP1, reduzindo assim a ativação de CASP1 e a liberação de IL1B.
• Em nível subcelular, o Bcl-2 localiza-se na membrana externa mitocondrial, membrana nuclear, membrana do retículo endoplasmático e citoplasma.
• A expressão tecidual é ampla, com os níveis mais altos nos tecidos reprodutivos. No cérebro adulto, é encontrado em células mitrais do bulbo olfatório, neurônios granulares e piramidais do hipocampo, núcleos pontinos, neurônios granulares do cerebelo e células ependimárias; a expressão pré-natal no cérebro é maior no neuroepitélio e na placa cortical.
• A proteína tem um peso molecular calculado de aproximadamente 26,6 kDa e está sujeita a modificações pós-traducionais, como fosforilação e ubiquitinação (conjugação de Ubl).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno inclui um peptídeo sintético correspondente aos resíduos 1–100 do Bcl-2 de rato, sugerindo que o anticorpo reconhece a região N-terminal. Esta região pode ser conservada entre espécies; a reatividade cruzada com camundongo é confirmada, mas testes em espécies adicionais devem ser validados.
• Para Western blot (WB), carregue lisados de controle positivo apropriados (por exemplo, de tecidos ou células de rato ou camundongo que expressam Bcl-2) e espere uma banda em ~26 kDa. Condições redutoras são tipicamente usadas, mas a otimização pode ser necessária.
• Para imunoprecipitação (IP), titule a quantidade de anticorpo e inclua controles de isótipo relevantes. A pré-limpeza dos lisados pode reduzir a ligação inespecífica.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; valide o emparelhamento com um anticorpo secundário adequado para o formato do seu ensaio.
• Inclua sempre controles negativos apropriados para avaliar a especificidade e considere testar no sistema endógeno de interesse.

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