Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Bcl-XL para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q07817

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Bcl-XL

• A proteína 1 semelhante a Bcl-2 (Bcl-X) é um regulador da apoptose codificada pelo gene BCL2L1, produzindo duas principais isoformas por splicing alternativo: Bcl-X(L) (longa) e Bcl-X(S) (curta).
• O Bcl-X(L) inibe potente a morte celular bloqueando o canal aniônico dependente de voltagem (VDAC) na membrana mitocondrial, impedindo a liberação de citocromo c (CYC1) e a subsequente ativação de caspases. Ele também regula o ponto de verificação G2 e a progressão para a citocinese durante a mitose.
• A isoforma Bcl-X(S) promove a apoptose, contrastando com o papel antiapoptótico do Bcl-X(L).
• O Bcl-X(L) localiza-se nas membranas interna e externa das mitocôndrias, na matriz mitocondrial, e também nas membranas de vesículas sinápticas, citoplasma, centríolos e membranas nucleares, refletindo seus papéis multifacetados.
• Em neurônios, o Bcl-X(L) regula a plasticidade pré-sináptica controlando a liberação e recuperação de neurotransmissores, o número de mitocôndrias axonais e o tamanho dos aglomerados de vesículas sinápticas. Durante a estimulação sináptica, ele aumenta a disponibilidade de ATP mitocondrial via regulação da ATP sintase F(1)F(0) e facilita a recuperação de vesículas endocíticas através da ativação da GTPase DMN1L (PubMed:17418785). Referências relacionadas: PMID:17418785
• O Bcl-X(L) pode atenuar a inflamação prejudicando a ativação do inflamossoma NLRP1, reduzindo assim a ativação de CASP1 e a liberação de IL1B.
• Expressão específica do tecido: o Bcl-X(S) é altamente expresso em células com alta renovação (por exemplo, linfócitos em desenvolvimento), enquanto o Bcl-X(L) predomina em células pós-mitóticas de longa vida, como o cérebro adulto.
• Modificações pós-traducionais incluem fosforilação e conjugação de ubiquitina, conforme indicado por palavras-chave.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-80) do Bcl-XL humano, conservada entre humanos, camundongos e ratos, suportando uma ampla reatividade.
• Para Western blotting, espere uma banda em torno de 26–30 kDa para o Bcl-X(L). O Bcl-X(S) pode aparecer como uma banda menor (~20 kDa), dependendo do tipo de tecido/célula. Use controles positivos apropriados, como lisados de HeLa, Jurkat ou cérebro.
• Para IHC-P, valide com tecidos conhecidos como positivos para Bcl-XL (por exemplo, cérebro, tecidos linfoides); a recuperação de antígeno pode ser necessária.
• Para IF/ICC, o Bcl-XL localiza-se nas mitocôndrias; recomenda-se a co-coloração com marcadores mitocondriais (por exemplo, MitoTracker).
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como anticorpo de captura em ELISA sanduíche quando emparelhado com um anticorpo de detecção correspondente; otimize as condições de revestimento.
• Como um anticorpo policlonal, verifique a consistência de lote para lote em seu sistema de ensaio pretendido.

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