Anticorpo Monoclonal Anti-BCL6 () para Citometria de Fluxo Intracelular - P41182

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do BCL6

• O BCL6 (linfoma de células B 6) é um repressor transcricional fundamental para a formação dos centros germinativos e a maturação da afinidade dos anticorpos, codificado pelo gene BCL6 (GeneID: 604), com múltiplas isoformas geradas por splicing alternativo.
• Ele se liga à sequência consenso de DNA 5'-TTCCTAGAA-3' e recruta complexos correpressores, incluindo histona desacetilases, para silenciar genes-alvo envolvidos na diferenciação, apoptose e controle do ciclo celular em células B dos centros germinativos.
• O BCL6 autorregula sua própria expressão e regula indiretamente a expressão de AICDA ao reprimir microRNAs como o miR-155, promovendo assim a recombinação de troca de classe das imunoglobulinas e a hipermutação somática, enquanto suprime a apoptose dependente de p53.
• Nas células T auxiliares foliculares (TFH), o BCL6 promove o programa gênico das TFH e inibe a diferenciação nas linhagens TH1, TH2 e TH17, sendo essencial para a memória imunológica tanto nas células B quanto nas células T.
• Ele também reprime a proliferação de macrófagos ao competir com STAT5 pelos motivos de ligação em genes-alvo como CCL2 e CCND2, além de mediar a interrupção do ciclo celular em células B dos centros germinativos sob estresse genotóxico por meio de vias dependentes e independentes de p53.
• Além da imunidade, o BCL6 controla a neurogênese ao alterar a transcrição dependente de NOTCH em alvos como HES5, recrutando a desacetilase SIRT1 para induzir o silenciamento epigenético e a diferenciação neuronal.
• Subcelularmente, o BCL6 está localizado exclusivamente no núcleo, em conformidade com seu papel como fator de transcrição ligado ao DNA.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e acetilação, e a proteína apresenta um domínio BTB/POZ N-terminal e dedos de zinco C-terminais, sendo classificada como um repressor transcricional com dedos de zinco.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 235–350 (região central fora do domínio BTB), o que pode resultar em um anticorpo que reconhece ambas as principais isoformas (72 kDa e 78 kDa); valide a especificidade no tipo celular-alvo.
• Como este anticorpo é diretamente conjugado ao ABflo® 488, ele é adequado para citometria de fluxo intracelular; otimize as etapas de fixação e permeabilização para seu alvo nuclear, a fim de garantir acessibilidade adequada ao epítopo.
• Como o BCL6 é expresso transitoriamente durante a diferenciação das células GCB, considere o uso de estratégias de gating apropriadas e a co-coloração com marcadores (por exemplo, CD38, CD20) para identificar células B dos centros germinativos ou células TFH em amostras humanas.
• Confirme a reatividade cruzada com suas amostras, pois a reatividade documentada é limitada a humanos; realize validação adicional se estiver trabalhando com primatas não humanos ou outras espécies.

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