Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Beclin 1 (Validado por KO) para WB e ELISA - Q14457

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Beclin 1

• A Beclin-1 desempenha um papel central na autofagia como uma subunidade central do complexo de fosfatidilinositol 3-quinase de classe III (PI3K), mediando a formação de fosfatidilinositol 3-fosfato; formas distintas de complexos (PI3KC3-C1 e PI3KC3-C2) impulsionam a iniciação e maturação do autofagossomo, respectivamente (PubMed:18570871, PubMed:21358617, PubMed:23184933).
  Referências relacionadas: PMID:18570871 PMID:21358617 PMID:23184933

• Também está envolvida no tráfego endocítico degradativo, endocitose e na etapa de abscisão da citocinese, provavelmente no contexto do PI3KC3-C2 (PubMed:20208530, PubMed:20643123, PubMed:23974797, PubMed:25275521).
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• A Beclin-1 localiza-se amplamente no citoplasma, aparelho de Golgi, membrana da rede trans-Golgi, membrana do endossomo, membrana do retículo endoplasmático, membrana mitocondrial, autofagossomos e núcleo, consistente com suas diversas funções de tráfego e sinalização.

• Um fragmento C-terminal de 35 kDa (Beclin-1-C) localiza-se especificamente nas mitocôndrias, onde pode promover a apoptose induzindo a translocação de BAX e a liberação de fatores pró-apoptóticos.

• Contribui para a defesa antiviral do hospedeiro; por exemplo, protege contra a infecção por uma cepa neurovirulenta do vírus Sindbis.

• A expressão da Beclin-1 é ubíqua, destacando seu papel fundamental na homeostase celular.

• A proteína está sujeita a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação (conforme indicado por Palavras-chave: Fosfoproteína, Acetilação, Conjugação Ubl, Ligação Isopeptídica), modulando sua atividade na autofagia e apoptose.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio abrange os 280 aminoácidos N-terminais, cobrindo domínios funcionais críticos; este projeto pode permitir a detecção tanto da Beclin-1 de comprimento total (~52 kDa) quanto da isoforma mitocondrial de 35 kDa em alguns contextos.
• Para Western blotting, considere usar lisados celulares totais de células humanas, de camundongo ou de rato. Embora o peso molecular previsto seja 52 kDa, a banda pode aparecer próximo a 60 kDa devido a modificações pós-traducionais; valide com controles de nocaute quando disponíveis.
• Em aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado para ELISA direto ou de captura; diluições de trabalho ideais devem ser determinadas empiricamente com a matriz de amostra relevante.
• Como a expressão da Beclin-1 pode ser induzida por estímulos de autofagia, incluir controles positivos (por exemplo, células tratadas com privação ou rapamicina) pode auxiliar na validação do ensaio.

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