Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-beta-glucuronidase (GUSB) para WB e ELISA - P08236

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da beta-glucuronidase (GUSB)

• A beta-glucuronidase (GUSB) é uma glicosidase lisossomal que catalisa a hidrólise de resíduos glucurónidos de glicosaminoglicanos, desempenhando um papel essencial na degradação dos sulfatos de dermatan e queratan.
• Esta proteína é codificada pelo gene GUSB, que dá origem a múltiplos isoformas através de splicing alternativo.
• A GUSB está localizada no lisossoma, onde funciona no ambiente ácido para decompor carboidratos complexos.
• Como uma glicoproteína, a GUSB sofre modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação ligada a N, que é crítica para sua atividade enzimática e direcionamento lisossomal.
• Mutações no gene GUSB estão associadas à mucopolissacaridose tipo VII (MPS VII, síndrome de Sly), uma doença de depósito lisossomal caracterizada pelo acúmulo de sulfatos de dermatan e queratan.
• A enzima foi identificada através de sequenciamento direto de proteínas e proteômica, confirmando sua presença em múltiplos tecidos.
• O peso molecular da proteoma de referência do precursor não processado é de aproximadamente 74,7 kDa, enquanto a proteína madura migra em torno de 75 kDa em SDS-PAGE.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange a região N-terminal (aminoácidos 1–100). Para análise por Western blot, condições desnaturantes e redutoras são tipicamente adequadas para expor este epítopo linear. Considere usar um protocolo padrão de SDS-PAGE e transferência para membrana de PVDF.
• Para aplicações de ELISA, o anticorpo pode ser usado como anticorpo de captura ou detecção. Recomenda-se titular o anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal para o seu formato de ensaio específico.
• Como o anticorpo é reativo com a GUSB humana, certifique-se de que suas amostras são de origem humana (por exemplo, linhagens celulares, lisados de tecido). A reatividade cruzada com outras espécies não foi determinada, portanto, a validação em sistemas não humanos não é recomendada sem verificação experimental.
• O peso molecular previsto da GUSB madura é de ~75 kDa; uma banda deste tamanho deve ser observada no Western blot. Use marcadores de peso molecular apropriados e considere controles de carga.

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