Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-Bif-1 para IF/ICC, ELISA - Q9Y371

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Bif-1

• Endofolina-B1 (Bif-1, SH3GLB1) é uma proteína de 41 kDa codificada pelo gene SH3GLB1 em humanos, existindo como duas isoformas splicing alternativas com papéis distintos: a isoforma 1 promove a apoptose, enquanto a isoforma 2 protege a viabilidade neuronal.
• Bif-1 desempenha um papel crítico na dinâmica da membrana externa mitocondrial e é necessária para a morfologia e função mitocondrial normal.
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• É um mediador chave da apoptose dependente de caspase ao promover a ativação de BAX/BAK1 e também está envolvida na morte celular independente de caspase durante a privação de nutrientes.
  Referências relacionadas: PMID:16227588
• Bif-1 ativa a quinase lipídica PIK3C3 (VPS34) durante a autofagia ao se associar ao complexo PI3K II (PI3KC3-C2), regulando a formação do autofagossomo e o tráfego de ATG9A do Golgi.
  Referências relacionadas: PMID:17891140 PMID:21068542
• Ela participa de eventos de remodelação da membrana, incluindo a tubulação e fragmentação da membrana do Golgi, e pode promover a fusão membranar ao recrutar proteínas para membranas de alta curvatura.
  Referências relacionadas: PMID:11604418
• Subcelularmente, Bif-1 se localiza no citoplasma, aparelho de Golgi, membrana externa mitocondrial, membrana do autofagossomo e no corpo médio durante a citocinese.
• A expressão tecidual é mais alta no coração, músculo esquelético, rim e placenta, com níveis mais baixos no cérebro, cólon, timo, baço, fígado, intestino delgado, pulmão e leucócitos do sangue periférico.
• Pós-traducionalmente, Bif-1 está sujeita à acetilação e fosforilação; ela possui um domínio SH3 e regiões de bobina enrolada críticas para interações proteicas e associação com a membrana.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para IF/ICC, use fixação apropriada (ex: 4% PFA) e permeabilização (ex: 0,1% Triton X-100). Considere incluir uma etapa de bloqueio com 5% de BSA para reduzir o fundo.
• No ELISA, realize uma série de diluições (ex: começando em 1:500) para determinar a concentração ótima do anticorpo para o seu revestimento de antígeno e sistema de detecção específicos.
• Valide a especificidade do anticorpo em linhas celulares humanas conhecidas por expressar Bif-1, como HeLa ou HEK293. Inclua um controle negativo (ex: silenciamento por siRNA) para confirmar o reconhecimento do alvo.
• Por se tratar de um anticorpo policlonal, esteja ciente da possível variabilidade entre lotes; recomendamos qualificar cada novo lote no seu ensaio.

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