Anticorpo Monoclonal Anti-BMAL1 para WB, ELISA - O00327

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do BMAL1

• BMAL1 (Proteína semelhante ao ARNT de hélice-alça-hélice básica 1) é um ativador transcricional que forma um heterodímero com CLOCK ou NPAS2 para ativar a transcrição de genes contendo elementos E-box, servindo como um componente positivo central do relógio circadiano.
• O relógio circadiano molecular consiste em loops de feedback de transcrição/tradução interconectados; os heterodímeros CLOCK/NPAS2-BMAL1 ativam os genes period (PER) e cryptochrome (CRY), cujos produtos proteicos reprimem a atividade de CLOCK/NPAS2-BMAL1, gerando oscilações de ~24 horas na expressão gênica.
• O heterodímero CLOCK-BMAL1 liga-se preferencialmente ao motivo E-box 5'-CACGTGA-3', com o BMAL1 reconhecendo o sítio de meia extremidade 3' 5'-GTGA-3'; também reconhece motivos não canônicos 5'-AACGTGA-3' e 5'-CATGTGA-3'. Referências relacionadas: PMID:23229515
• O BMAL1 regula positivamente a miogênese e regula negativamente a adipogênese através de genes da via Wnt; nas células beta pancreáticas, controla a secreção de insulina estimulada por glicose através da expressão de genes antioxidantes mediada por NRF2, e regula negativamente a sinalização mTORC1.
• Promove a abertura rítmica da cromatina e é essencial para a interação rítmica do CLOCK com ASS1, regulando positivamente a acetilação mediada pelo CLOCK da ASS1. Referências relacionadas: PMID:28985504
• Funções adicionais incluem a regulação da neurogênese adulta do hipocampo, o controle diurno do metabolismo do músculo esquelético (via DGAT2 e COQ10B) e o recrutamento rítmico de monócitos inflamatórios Ly6C através da expressão de quimiocinas mediada por PRC2.
• Localiza-se no núcleo, citoplasma e corpos PML; sujeito a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, acetilação e ubiquitinação (formação de ligação isopeptídica).
• Altamente expresso no cérebro adulto, músculo esquelético, coração e folículos pilosos; também implicado na regulação da entrada e replicação do SARS-CoV-2 em células epiteliais pulmonares.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 500–600 do BMAL1 humano; considere que os epítopos podem residir em regiões variáveis ou conservadas. Valide a reatividade cruzada de espécies no seu contexto experimental específico.
• Para Western blot (WB), o peso proteico previsto é de ~69 kDa; verifique o preparo apropriado da amostra e os controles de carregamento. A reatividade de espécies é confirmada para humano, camundongo e rato.
• Para aplicações de ELISA, otimize o antígeno de revestimento e a diluição do anticorpo usando titulações de xadrez padrão. Note que os detalhes do protocolo (ELISA direto, indireto, sanduíche) devem ser estabelecidos empiricamente.
• Dada a natureza circadiana da expressão do BMAL1, considere os efeitos da coleta dependente da hora do dia ao desenhar os experimentos.

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