Anticorpo Policlonal Anti-BMAL1 para WB, ELISA - O00327

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do BMAL1

• O BMAL1 (ARNTL) é um fator de transcrição da família hélice-alça-hélice básica PAS que forma um componente central do relógio circadiano. Ele heterodimeriza com CLOCK ou NPAS2 para impulsionar a expressão de genes do relógio e genes controlados pelo relógio através de elementos E-box, regulando ritmos fisiológicos diários.
• O heterodímero CLOCK-BMAL1 reconhece motivos E-box canônicos (5′-CACGTG-3′) e não canônicos, com um motivo de ligação preferencial de 5′-CACGTGA-3′. O BMAL1 se liga ao meio sítio GTGA enquanto o CLOCK se liga ao CAC (PubMed:23229515). Referências relacionadas: PMID:23229515
• O BMAL1 desempenha um papel crítico na abertura rítmica da cromatina, e o complexo BMAL1-CLOCK regula a expressão circadiana de numerosos genes envolvidos no metabolismo, incluindo SERPINE1, NAMPT, DBP e PPARGC1A, ligando o relógio à homeostase metabólica.
• Além do relógio central, o BMAL1 tem funções específicas de tecido: promove a miogênese em detrimento da adipogênese via sinalização Wnt canônica, regula a função das células β pancreáticas e a secreção de insulina estimulada por glicose, controla o tráfego rítmico de monócitos e suporta a neurogênese hipocampal adulta.
• O BMAL1 está sujeito a extensas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, fosforilação e ubiquitinação, que modulam sua estabilidade, atividade e duração do período. A acetilação mediada por CLOCK da ASS1 é dependente de BMAL1 (PubMed:28985504). Referências relacionadas: PMID:28985504
• Em nível subcelular, o BMAL1 transita entre o núcleo e o citoplasma e se localiza aos corpos nucleares PML; é altamente expresso no cérebro, músculo esquelético, coração e folículos pilosos.
• No contexto de infecção, o BMAL1 regula a entrada e replicação do SARS-CoV-2 em células epiteliais pulmonares, provavelmente via modulação pós-transcricional do ACE2 e genes estimulados por interferon.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 380–510, uma região fora dos domínios bHLH e PAS; esta escolha pode reduzir a reatividade cruzada com outras proteínas bHLH-PAS e melhorar a detecção do BMAL1 de comprimento total.
• Para Western blotting, uma banda esperada próxima de 69 kDa deve ser observada em extratos celulares de humano, camundongo e rato (por exemplo, HeLa, cérebro de camundongo, fígado de rato). Use controles de carregamento apropriados e considere a extração nuclear para enriquecer o sinal.
• Para aplicações de ELISA, otimize a concentração de revestimento do imunógeno recombinante ou proteína nativa e valide a especificidade usando ensaios de competição ou modelos de knockout.
• Reatividade cruzada com camundongo e rato é antecipada; no entanto, o alinhamento da sequência da região do imunógeno entre espécies é recomendado para confirmar a conservação do epítopo.

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