Anticorpo policlonal anti-Bmi1 para WB, IF/ICC, ELISA - P35226

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de Bmi1

• A proteína BMI-1 do complexo Polycomb (também conhecida como PCGF4, RNF51) é um componente central do complexo repressivo Polycomb 1 (PRC1), que mantém a repressão transcricional de genes essenciais ao desenvolvimento, incluindo os agrupamentos Hox, por meio da remodelação da cromatina e de modificações nas histonas.
• No complexo PRC1, BMI-1 atua em conjunto com RNF2/RING2 para catalisar a monoubiquitinação da histona H2A na Lys-119 (H2AK119ub), uma marca epigenética crítica para o silenciamento gênico estável. Referências relacionadas: PMID:15386022, PMID:16359901, PMID:16714294
• O complexo ternário RNF2-UB2D3-BMI1 liga-se especificamente aos nucleossomos e exerce sua atividade de ligase de ubiquitina E3 exclusivamente sobre a histona H2A nucleossômica, destacando sua função direcionada à cromatina. Referências relacionadas: PMID:21772249, PMID:25355358
• BMI-1 atua como um regulador positivo da atividade de ligase de ubiquitina de RNF2, aumentando assim a ubiquitinação de H2A mediada por PRC1 e reforçando a repressão transcricional mediada por Polycomb. Referências relacionadas: PMID:21772249, PMID:26151332
• A localização subcelular é predominantemente nuclear, em conformidade com seu papel na regulação da cromatina, embora também tenha sido observada distribuição citoplasmática em determinadas condições (UniProt: LOCALIZAÇÃO SUBCELULAR).
• BMI-1 é classificado como um proto-oncogene e regulador da cromatina, apresentando um domínio dedo de RING que coordena íons de zinco essenciais para sua integridade estrutural e função (UniProt: PALAVRAS-CHAVE).

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 120-326 de BMI-1 humano, uma região central que pode gerar anticorpos capazes de reconhecer múltiplas conformações ou estados de interação; valide a especificidade no sistema de amostra relevante.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 37 kDa; considere utilizar um controle de carregamento de tamanho semelhante e otimize as condições de lise para preservar a integridade da proteína.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica, os protocolos de fixação e permeabilização podem afetar a acessibilidade do antígeno; testar diferentes métodos (por exemplo, metanol versus formaldeído) pode melhorar a coloração nuclear.
• O desempenho no ELISA pode ser verificado utilizando o imunógeno recombinante como controle positivo; inclua controles negativos apropriados para avaliar a ligação inespecífica.
• Como se trata de um anticorpo policlonal, a consistência entre lotes deve ser monitorada durante a transição entre lotes, e pode ser necessário reotimizar os fatores de diluição.

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