Anticorpo Policlonais Anti-BNIP3 para WB, IHC-P, ELISA - Q12983

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da BNIP3

• BNIP3 (proteína 3 que interage com a proteína BCL2/adenovírus E1B de 19 kDa) é um membro pró-apoptótico da família BCL2 que pode superar a supressão da sobrevivência mediada por BCL2 e participar da repartição do cálcio entre os depósitos intracelulares.
• Desempenha um papel fundamental no controle da qualidade mitocondrial ao interagir com SPATA18/MIEAP, promovendo a degradação de proteínas mitocondriais danificadas pela via MALM (processo catabólico de proteínas mitocondriais).
• Junto com BNIP3L/NIX, a BNIP3 regula a formação de um poro na dupla membrana mitocondrial, permitindo a translocação de proteínas lisossômicas para a matriz mitocondrial para a renovação do organelo.
• BNIP3 está envolvida na morte celular induzida pela calprotectina (S100A8/A9), ligando a sinalização da imunidade inata à disfunção mitocondrial e à execução da apoptose.
• A proteína se localiza na membrana externa mitocondrial por meio de um domínio transmembranar C-terminal, e sua atividade é modulada por fosforilação.
• BNIP3 tem sido implicada em interações hospedeiro-vírus, contrabalanceando fatores virais anti-apoptóticos como o E1B 19K do adenovírus, e faz parte do proteoma de referência com um peso molecular calculado de ~21,5 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blot, o anticorpo detecta uma banda de aproximadamente 22 kDa em condições redutoras; considere o uso de um gel SDS-PAGE de 12–15% para uma resolução ideal.
• Valide a reatividade em linhagens celulares ou lisados de tecido humano, de camundongo ou de rato; inclua controles positivos (por exemplo, células tratadas com hipóxia ou indutores de apoptose) e negativos apropriados.
• Para IHC-P, realize a recuperação de antígeno (por exemplo, tampão de citrato, pH 6,0) e titre o anticorpo primário para minimizar o fundo; valide em cortes de tecido relevantes (por exemplo, coração, músculo esquelético ou biópsias de tumor).
• Em ELISA, considere usar o anticorpo como reagente de captura ou detecção após confirmar a afinidade de ligação contra BNIP3 recombinante ou nativa.
• Como BNIP3 é uma proteína de membrana, use tampões de lise suaves (por exemplo, RIPA com inibidores de protease) e evite ferver as amostras excessivamente para impedir a agregação.

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