Anticorpo policlonal anti-BRCA1 para WB e ELISA - P38398

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da BRCA1

• A BRCA1 é uma fosfoproteína nuclear de 208 kDa que atua como uma ligase de ubiquitina-proteína E3, mediando especificamente a formação de cadeias de poliubiquitina ligadas a 'Lys-6'. Referências relacionadas: PMID:10500182, PMID:12887909, PMID:12890688
• Como parte do heterodímero BRCA1-BARD1, desempenha um papel central no reparo de danos ao DNA, coordenando a recombinação homóloga, os pontos de controle do ciclo celular e a regulação transcricional para manter a estabilidade genômica. Referências relacionadas: PMID:12890688, PMID:14976165, PMID:20351172
• É necessária para a interrupção adequada do ciclo celular após a radiação ionizante, tanto na fase S quanto na fase G2, e para o direcionamento de FANCD2 aos locais de danos no DNA. Referências relacionadas: PMID:10724175, PMID:11836499, PMID:12183412, PMID:12887909
• Contribui para o reparo por recombinação homóloga por meio da interação direta com PALB2, facilitando o recrutamento da maquinaria de reparo BRCA2-RAD51 para as quebras no DNA. Referências relacionadas: PMID:19369211
• Também regula a nucleação de microtúbulos no centrossomo, inibe a síntese lipídica por meio da ligação à ACACA fosforilada inativa e atua como ativador transcricional. Referências relacionadas: PMID:18056443, PMID:16326698, PMID:20160719
• É amplamente expressa como as isoformas 1 e 3; a isoforma 3 está reduzida ou ausente em várias linhagens celulares de câncer de mama e ovário.
• É modificada pós-traducionalmente por fosforilação, acetilação e ubiquitinação; contém um domínio dedo de zinco do tipo RING e é classificada como supressora tumoral.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região N-terminal (aa 100–200) da BRCA1 humana. A natureza policlonal pode resultar no reconhecimento de múltiplos epítopos; considere a pré-adsorção se for necessária alta especificidade.
• Para Western blot, espere uma banda principal em torno de 208 kDa. Otimize a porcentagem do gel (por exemplo, 6–8%) e as condições de transferência para proteínas de alto peso molecular.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser utilizado para captura ou detecção; a diluição ideal e a combinação adequada devem ser determinadas empiricamente.
• Foi observada reatividade cruzada com BRCA1 de camundongo; valide o desempenho se o anticorpo for utilizado em sistemas de modelos murinos.

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