Anticorpo Policloal de Coelho Anti-BRD2 para WB, ELISA - P25440

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do BRD2

• BRD2 (proteína 2 contendo bromodomínio), também conhecido como O27.1.1, é um membro da família bromodomínio e terminal extra (BET), caracterizado por dois bromodomínios N-terminais e um domínio terminal extra. É codificado pelo gene humano BRD2 (ID do Gene: 6046).
• Atua como um leitor de cromatina que reconhece e se liga especificamente à histona H4 acetilada nas lisinas 5 e 12 (H4K5ac e H4K12ac), controlando assim a expressão gênica e o remodelamento da cromatina. Referências relacionadas: PMID:17148447 PMID:17848202 PMID:18406326
• Desempenha um papel fundamental na compartimentalização do genoma ao se associar a CTCF e coesina; é recrutado para a cromatina por CTCF e promove a formação de domínios topologicamente associados (TADs), contribuindo para a formação de fronteiras e isolamento de amplificadores. Referências relacionadas: PMID:35410381
• Recruta fatores de transcrição e coativadores para sítios alvo do gene, e ativa a maquinaria da RNA polimerase II para alongamento transcricional. Também se liga a proteínas não histonas acetiladas, como a STAT3 acetilada na Lisina-87, promovendo o recrutamento da STAT3 para a cromatina. Referências relacionadas: PMID:28262505
• Está envolvido na resposta inflamatória ao regular a diferenciação de linfócitos T CD4+ virgens em células T auxiliares Th17, processo mediado pelo reconhecimento de STAT3 acetilado. Referências relacionadas: PMID:28262505
• Além de lisinas acetiladas, o BRD2 reconhece resíduos de lisina nas histonas que são tanto metilados quanto acetilados (N6-acetil-N6-metillisina, Kacme), uma marca epigenética da cromatina ativa. Liga-se especificamente à histona H4 acetil-metilada nas Lisinas 5 e 12 (H4K5acme e H4K12acme). Referências relacionadas: PMID:37731000
• Localiza-se no núcleo e se associa aos cromossomos. É anotado com palavras-chave incluindo splicing alternativo, bromodomínio, regulador da cromatina, interação hospedeiro-vírus e regulação da transcrição.
• Tem um peso molecular calculado de aproximadamente 88 kDa, consistente com a banda observada de ~88 kDa em western blots.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1-100) do BRD2 humano, que inclui o primeiro bromodomínio; essa região é altamente conservada, portanto considere a reatividade cruzada com outros membros da família BET (BRD3, BRD4, BRDT) ao interpretar resultados em espécies com sequências semelhantes.
• Para western blot, é esperada uma banda de ~88 kDa em lisados de células humanas; recomendamos otimizar a diluição do anticorpo e usar extratos nucleares para enriquecer a proteína alvo.
• A validação em ELISA já foi realizada; para detecção quantitativa, considere o pareamento com um anticorpo de captura para desenvolver um ELISA sanduíche, e valide a linearidade e sensibilidade na sua matriz de amostra específica.
• O anticorpo foi produzido em coelho; use anticorpos secundários anti-coelho adequados para detecção sem reatividade cruzada com IgG de outras espécies em ensaios multiplex.

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