Anti-BRD4 Anticorpo Monoclonal de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - O60885

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do BRD4

• O BRD4 (Proteína contendo domínio bromodominio 4, também conhecida como HUNK1) é uma proteína leitora de cromatina que reconhece histonas acetiladas, desempenhando um papel fundamental na transmissão da memória epigenética através das divisões celulares.
  Referências relacionadas:
  PMID:20871596 PMID:23086925 PMID:23317504
• Permanece associado à cromatina acetilada durante todo o ciclo celular para preservar o estado da cromatina e manter a estrutura de alta ordem, fornecendo memória para a transcrição gênica pós-mitótica.
  Referências relacionadas:
  PMID:22334664 PMID:23317504 PMID:23589332
• Durante a interfase, o BRD4 regula a transcrição gênica induzível por sinal ao recrutar o complexo P-TEFb para promotores e intensificadores distais, colaborando com a JMJD6 para ativar o P-TEFb e promover a fosforilação da CTD da RNA polimerase II.
  Referências relacionadas:
  PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240
• O BRD4 também promove a fosforilação do 'Ser-2' da CTD da RNA polimerase II, seja através do recrutamento do P-TEFb ou via uma atividade quinásica intrínseca relatada que requer mais evidências in vivo.
  Referências relacionadas:
  PMID:23086925 PMID:22509028
• Reconhece a RELA acetilada, aumentando a ativação transcricional do NF-kappa-B ao recrutar o complexo P-TEFb.
  Referências relacionadas:
  PMID:19103749
• O BRD4 funciona como um isolador de cromatina na resposta a danos no DNA, recrutando o complexo condensina-2 para histonas acetiladas e limitando a propagação da fosforilação da H2AX.
• Subcelularmente, o BRD4 localiza-se no núcleo e associa-se aos cromossomos.
• É expresso ubiquamente nos tecidos e está sujeito a modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação; contém bromodomínios e está implicado em interações hospedeiro-vírus e variantes da doença.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético dentro dos aminoácidos 100–200 do BRD4 humano, sugerindo que o anticorpo pode reconhecer um epítopo nesta região N-terminal.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de ~152 kDa; considere usar uma porcentagem apropriada de gel e tempos de transferência estendidos para proteínas de alto peso molecular como esta. Valide com controles positivos e negativos no sistema de amostra relevante.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), as condições de recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato ou EDTA, induzida por calor) podem ser otimizadas para o seu tipo de tecido específico. Como o BRD4 é expresso ubiquamente, inclua controles de tecido adequados.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; o pareamento com anticorpos apropriados e a validação com a proteína BRD4 recombinante ou lisados celulares é recomendado.

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