Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-BRIP1 para WB e ELISA - Q9BX63

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de BRIP1

• BRIP1 codifica a proteína do grupo J da anemia de Fanconi (FANCJ), também conhecida como helicase C-terminal associada a BRCA1 1 (BACH1) e proteína 1 que interage com BRCA1. Pertence à família das helicases DEAH e contém um domínio de agrupamento de ferro-enxofre 4Fe-4S essencial para sua atividade helicásica.
• Funciona como ATPase dependente de DNA e helicase de DNA 5'-3' que mantém a estabilidade cromossômica ao resolver estruturas secundárias de DNA durante a replicação e o reparo. Referências relacionadas: PMID:11301010 PMID:14983014 PMID:16116421
• Desempenha um papel fundamental na via da anemia de Fanconi (FA), agindo a jusante da ubiquitinação de FANCD2 para reparar ligações cruzadas intercadeiras do DNA. Facilita o reparo por recombinação homóloga de quebras duplas de DNA através de sua interação com BRCA1. Referências relacionadas: PMID:14983014 PMID:16153896
• Remove ligações cruzadas proteico-DNA associadas a sítios abásicos nas garfos de replicação através do desdobramento conduzido por helicase dos adutos HMCES, permitindo a clivagem mediada por SPRTN e a resolução da lesão. Referências relacionadas: PMID:16116421 PMID:36608669
• Desenrola híbridos RNA:DNA e estruturas de DNA G-quadruplex (G4); o desenrolamento de G4 requer uma cauda de DNA fita simples 5', indicando especificidade para substratos associados à replicação. Referências relacionadas: PMID:14983014 PMID:18426915 PMID:20639400
• Se localiza tanto no núcleo quanto no citoplasma, com expressão ubíqua e níveis mais altos no testículo. Sofre modificações pós-traducionais incluindo fosforilação e acetilação, e mutações em BRIP1 estão associadas à anemia de Fanconi e predisposição ao câncer.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos 260 aminoácidos N-terminal de BRIP1, o que pode permitir o reconhecimento da proteína de comprimento total e de possíveis isoformas N-terminais. Verifique a especificidade usando controles apropriados ou modelos de knockdown/knockout.
• Para Western blotting, BRIP1 tem um peso molecular previsto de ~141 kDa. Otimize as condições de transferência para proteínas de alto peso molecular e carregue quantidade suficiente de proteína (por exemplo, 30–50 µg de extrato nuclear) devido à expressão endógena tipicamente baixa.
• Em aplicações de ELISA, use a proteína BRIP1 recombinante (por exemplo, o fragmento do imunógeno) como antígeno de revestimento positivo e valide a linearidade/faixa dinâmica com diluições seriadas.
• Agentes danificadores de DNA (por exemplo, mitomicina C ou cisplatina) podem upregular a expressão de BRIP1 ou alterar sua localização subcelular; considere o pré-tratamento das células para melhorar a detecção.

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