Anticorpo Policlonal Coelho Anti-BRSK1 para WB, IHC-P, ELISA - Q8TDC3

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da BRSK1

• A BRSK1 (também conhecida como SAD-B, hSAD1) é uma serina/treonina-proteína quinase pertencente à família AMPK, codificada pelo gene BRSK1 no cromossomo 19.
• Desempenha um papel fundamental na polarização neuronal ao fosforilar proteínas associadas a microtúbulos, como a MAPT/TAU nos resíduos Thr-529 e Ser-579, e ao fosforilar a WEE1 no resíduo Ser-642 para regular negativamente sua atividade.
• A BRSK1 regula a duplicação do centrossomo ao fosforilar a gama-tubulina (TUBG1 e TUBG2) no resíduo Ser-131, promovendo sua translocação para o centrossomo.
• A quinase é ativada por fosforilação mediada pela STK11/LKB1 e subsequentemente fosforila substratos incluindo CDC25B, CDC25C e RIMS1, ligando-a à regulação do ciclo celular e das vesículas sinápticas.
• Localiza-se no citoplasma, núcleo, centrossomo e vesículas sinápticas, alinhando-se com suas funções no ciclo celular, resposta a danos no DNA e liberação de neurotransmissores.
• A BRSK1 está envolvida no ponto de verificação de danos no DNA induzidos por UV, inibindo a atividade da CDK1 através da fosforilação e ativação da WEE1 e inibição da CDC25B e CDC25C.
• É amplamente expressa, com níveis mais altos no cérebro e testículo, e os níveis proteicos permanecem constantes ao longo do ciclo celular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting (WB), a banda prevista está em ~85 kDa; recomenda-se o uso de gel redutor e marcadores de peso molecular apropriados.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), o sinal pode ser influenciado pelo método de recuperação antigênica; testar tampões à base de citrato e EDTA pode ser benéfico.
• Como o anticorpo é policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada para ensaios quantitativos críticos.
• O imunógeno corresponde a uma região dentro do domínio quinase e da porção C-terminal; assim, o anticorpo pode reconhecer tanto a forma completa quanto variantes de splicing, se o epítopo for preservado.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato está indicada; no entanto, a homologia de sequência na região do imunógeno deve ser verificada se forem usadas amostras não humanas.
• Para aplicações de ELISA, o pareamento com um anticorpo de captura específico para BRSK1 pode aumentar a sensibilidade; considere testar formatos de ELISA direto e sanduíche.

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