Anticorpo policlonal de coelho anti-BSN para WB, IF/ICC, ELISA - Q9UPA5

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do BSN (Bassoon)

• O BSN codifica a proteína bassoon (também conhecida como proteína de dedo de zinco 231), uma grande proteína estrutural da matriz citoplasmática pré-sináptica na zona ativa (CAZ), onde ocorre a liberação de neurotransmissores (PubMed:12812759).
  Referências relacionadas: PMID:12812759
• Após a síntese, a bassoon participa da formação de organelas membranosas derivadas do complexo de Golgi, denominadas vesículas de transporte Piccolo-Bassoon (PTVs), que são transportadas ao longo dos axônios até os locais de contatos sinápticos nascentes (PubMed:19380881).
  Referências relacionadas: PMID:19380881
• Na zona ativa pré-sináptica, a bassoon regula a organização espacial dos agrupamentos de vesículas sinápticas, dos complexos proteicos que executam a fusão de membranas e da endocitose compensatória.
• A bassoon também desempenha funções na regulação da ubiquitinação de proteínas pré-sinápticas ao interagir com SIAH1 e na regulação da autofagia pré-sináptica ao se associar à ATG5.
• A bassoon medeia a comunicação entre a sinapse e o núcleo ao se associar ao correpressor transcricional CTBP1, reduzindo o tamanho da sua fração disponível para importação nuclear e, assim, reconfigurando a expressão gênica.
• A proteína inibe a atividade da fração da enzima DAO que se localiza na zona ativa pré-sináptica, o que pode modular a transmissão sináptica.
• O BSN é expresso exclusivamente no tecido cerebral, em consonância com suas funções sinápticas críticas.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Devido ao elevado peso molecular da bassoon (aproximadamente 416 kDa), considere o uso de géis de SDS-PAGE com baixa porcentagem (por exemplo, géis a 6% ou géis em gradiente) e tempos de transferência prolongados para western blotting.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), otimize os protocolos de fixação e permeabilização para preservar as estruturas sinápticas; a bassoon se localiza nas zonas ativas pré-sinápticas, portanto, recomenda-se a coloração simultânea com marcadores sinápticos.
• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 830-950 do BSN humano; verifique a especificidade do anticorpo em modelos relevantes de knockout ou knockdown.
• Este anticorpo apresenta reatividade cruzada com o BSN de camundongo, sendo adequado para estudos translacionais em tecido cerebral de camundongo.
• Para aplicações de ELISA, valide a compatibilidade do par de anticorpos e as condições do ensaio utilizando proteína recombinante purificada ou lisados de tecido nativo.

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