Anticorpo Policlonal Anti-BTK para WB, IHC-P, ELISA - Q06187

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do BTK

• BTK (quinase de tirosina Bruton) é uma quinase de tirosina não receptora essencial para o desenvolvimento, diferenciação e sinalização de linfócitos B. Fosforila PLCG2 em cooperação com BLNK após o engajamento do receptor de antígeno de células B (BCR), desencadeando a mobilização de cálcio a jusante e a ativação da proteína quinase C. Referências relacionadas: PMID:11606584
• Atua como uma plataforma de sinalização que faz a ponte entre diversas vias; envolvido na sinalização de receptores de citocinas e vias de receptores Toll-like (TLR), desempenhando um papel crítico na imunidade inata e adaptativa. Referências relacionadas: PMID:16517732 PMID:17932028
• Dentro da via TLR, o BTK regula a ativação do TLR9 em células B esplênicas e medeia a fosforilação de tirosina do TIRAP, levando à sua degradação. Referências relacionadas: PMID:16415872 PMID:16517732 PMID:17932028
• Induz a atividade de NF-kappa-B através da sinalização TLR8/9, regulando a transcrição de centenas de genes; também fosforila transitoriamente o fator de transcrição GTF2I, promovendo sua translocação nuclear e modulação da expressão gênica. Referências relacionadas: PMID:19290921 PMID:9012831
• Contribui para a regulação da transcrição através de ARID3A e NFAT; necessário para a formação do complexo de ligação ao DNA funcional ARID3A, embora não tenha sido demonstrada ligação direta ao DNA. Referências relacionadas: PMID:16738337
• Exibe um papel duplo na regulação da apoptose e participa da resposta de interferon do tipo I mediada por STING1 através da fosforilação de DDX41. Referências relacionadas: PMID:9751072 PMID:25704810
• A localização subcelular inclui citoplasma, membrana celular, núcleo e jangadas de membrana, refletindo seus papéis dinâmicos de sinalização. Predominantemente expresso em linfócitos B.
• As características da proteína incluem domínios SH2, SH3 e PH, um motivo dedo de zinco e um domínio de quinase; modificações pós-traducionais, como fosforilação e acetilação, regulam sua atividade.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os domínios PH e TH terminais N (aa 30-240), que medeiam o direcionamento à membrana e as interações proteína-proteína. Isso pode permitir o reconhecimento das formas fosforiladas e não fosforiladas do BTK.
• Para Western blot, espera-se uma banda em aproximadamente 76 kDa; valide a expressão usando linhagens de células de linfócitos B (por exemplo, Ramos, Raji) e controles de carregamento apropriados.
• Em IHC-P, considere a recuperação de epítopo induzida por calor e confirme o padrão de coloração em tecidos ricos em células B, como baço ou linfonodo; controles de isotipo são recomendados.
• Para ELISA, titule o anticorpo para determinar as concentrações ideais de revestimento e detecção; a reatividade cruzada com BTK de camundongo e rato pode facilitar estudos multiespécies.
• Observe que o BTK é expresso em baixos níveis em células não B; a inclusão de controles de amostra adequados é aconselhada para evitar falsos negativos.

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