Anticorpo Policlonal Anti-BUB1B para WB, IF/ICC, ELISA - O60566

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de BUB1B

• BUB1B (também conhecido como BUBR1, MAD3L, SSK1) é uma serina/treonina-proteína quinase que pertence à família BUB1 e é um componente central do complexo de checkpoint mitótico (MCC).
• Como parte do MCC (junto com CDC20, MAD2L1 e BUB3), BUB1B inibe o complexo promotor da anáfase/ciclosoma (APC/C), atrasando a segregação cromossômica até que todos os cromossomos estejam corretamente ligados ao fuso mitótico. Ele também monitora as atividades do cinetócoro dependentes de CENPE e é necessário para a localização do cinetócoro de CENPE. Referências relacionadas: PMID:27509861 PMID:11702782 PMID:14706340 PMID:15020684 PMID:10477750 PMID:19503101
• BUB1B regula negativamente a atividade de PLK1 em células em interfase, suprimindo assim a amplificação dos centrosomos. Também pode funcionar como um supressor de tumor. Referências relacionadas: PMID:19503101
• A localização subcelular inclui o citoplasma, núcleo, centromero/cinetócoro e centrosomo.
• É altamente expresso no timo e baço, e encontrado preferencialmente em tecidos com alto índice mitótico.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação; a proteína faz parte das vias de conjugação de ubiquitina. Existem múltiplas isoformas por splicing alternativo, e mutações estão associadas a variantes de doenças.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a região N-terminal (aa 1‑260) de BUB1B humano; esse design é adequado para detectar a proteína BUB1B total nas amostras.
• Para Western blotting, espere uma banda próxima a 120 kDa; otimize a porcentagem do gel, condições de transferência e bloqueio para minimizar sinais inespecíficos.
• Em imunofluorescência/ICC, use preparações de células em mitose para observar a localização característica do cinetócoro/centromero; é recomendado o co-marcação com marcadores de fuso ou de cinetócoro.
• Aplicações em ELISA podem ser usadas para quantificação relativa, mas as condições do ensaio devem ser validadas no sistema de amostra relevante.
• Sempre inclua controles positivos e negativos apropriados, e confirme a reatividade do anticorpo no seu contexto experimental específico.

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