Anticorpo Policlonais Anti-C10orf2/Helicase mtDNA Twinkle para WB, ELISA - Q96RR1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Helicase mtDNA Twinkle

• Helicase mitocondrial essencial envolvida na replicação e reparo do mtDNA. Ela impulsiona a separação da fita de DNA para formar garfos de replicação processivos para a síntese da fita líder. Referências relacionadas: PMID:12975372 PMID:15167897 PMID:17324440 PMID:18039713
• Participa do reparo do mtDNA, incluindo a dissociação de fitas invasoras de estruturas de loop D imóveis ou móveis, independentemente da polaridade de fita simples. Referências relacionadas: PMID:27226550
• Forma um complexo replissômico com a DNA polimerase gama (POLG) e a proteína mitocondrial de ligação ao DNA de fita simples (mtSSB). Desenrola preferencialmente substratos de DNA que contêm caudas de fita simples 5'- e 3'- pré-existentes e estruturas de aba 5'. Referências relacionadas: PMID:12975372 PMID:15167897 PMID:18039713
• Exibe atividades de anelamento de fita de DNA, troca de fita e migração de ramificação, além da função de helicase. Referências relacionadas: PMID:22383523 PMID:26887820 PMID:27226550
• Se localiza na matriz mitocondrial, nucleoides e membrana interna, consistente com seu papel na manutenção do mtDNA.
• A expressão tissular é mais alta no músculo esquelético, testículo e pâncreas, com níveis mais baixos no coração, cérebro, fígado, rim e outros tecidos. A expressão é co-regulada com MRPL43.
• O splicing alternativo produz uma isoforma sem atividades de desenrolamento do DNA e hidrólise de ATP, e incapaz de se ligar ao DNA de fita simples ou dupla. Referências relacionadas: PMID:18039713
• Está associado a múltiplas doenças mitocondriais, incluindo a oftalmoplegia externa progressiva (PEO) e a síndrome de depleção do DNA mitocondrial, destacando sua importância clínica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno mapeia para os aminoácidos 585–684, uma região provavelmente conservada em camundongo (indicado pela reatividade cruzada). Para Western blot, antecipe uma banda próxima de 77 kDa; confirme a detecção usando controles positivos e negativos apropriados no seu sistema de amostras.
• Para aplicações de ELISA, considere usar o peptídeo de imunização como antígeno de revestimento ou controle de competição para verificar a especificidade do anticorpo.
• Como reagente policlonal, a consistência entre lotes pode variar; é aconselhável qualificar cada novo lote no seu ensaio antes do uso em larga escala.
• Devido à localização intramitocondrial do Twinkle, garanta protocolos eficientes de enriquecimento ou lise mitocondrial ao preparar as amostras.

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