Anticorpo policlonal de coelho Anti-C4c para WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - P0C0L5

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Complemento C4-B

• O Complemento C4-B é um componente central das vias clássica e de lectina do complemento, funcionando como um precursor que é ativado proteoliticamente para promover a opsonização, eliminação de patógenos e sinalização imunológica adaptativa.
• Após a clivagem por C1S, MASP2 ou GZMK, o fragmento C4b se liga covalentemente às superfícies dos patógenos e recruta C2 para formar as C3 e C5 convertases. A isotipo C4b-B catalisa preferencialmente a transacilação do seu grupo carbonila tioéster para formar ligações éster com antígenos de carboidratos, enquanto o isotipo C4b-A forma ligações amida com antígenos proteicos. Referências relacionadas: PMID:8538770
• Durante a ativação, o fragmento anafilatoxina C4a é liberado; seu papel na inflamação local é controverso, pois relatos iniciais podem ter sido confundidos pela contaminação com C3a e C5a.
• O Complemento C4-B é expresso principalmente no fígado, com níveis moderados no córtex adrenal, medula adrenal, glândula tireoide e rim, e níveis mais baixos no coração, ovário, intestino delgado, timo, pâncreas e baço, sugerindo funções imunológicas sistêmicas e locais.
• Subcelularmente, o C4-B é secretado e também pode ser encontrado nas superfícies celulares, sinapses e projeções neuronais (axônios e dendritos), indicando papéis potenciais na poda sináptica e na neuroinflamação.
• A proteína sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação, sulfatação e fosforilação, e contém uma ligação tioéster crítica essencial para a ligação covalente às superfícies alvo.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde ao fragmento C4c (resíduos 1337–1446); espera-se que o anticorpo reconheça tanto o C4 de comprimento total quanto o fragmento C4c clivado. Valide a especificidade no seu sistema de amostras.
• Para western blot, o peso molecular previsto do C4 de comprimento total é de ~192 kDa; sob condições redutoras, podem ser observadas múltiplas bandas correspondentes às cadeias alfa, beta e gama. Considere otimizar as condições de carregamento de proteína e detecção.
• Em aplicações de imunofluorescência (IF/ICC, IF-P), os protocolos de permeabilização e fixação devem ser adaptados para detectar o C4 secretado e associado à membrana.
• A reatividade cruzada relatada com camundongo e rato permite o uso em modelos roedores; confirme a reatividade no seu tecido ou tipo celular de interesse.

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