Anticorpo Monoclonal Anti-Calreticulina [Validado por KO] para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P27797

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Calreticulina

• A Calreticulina (CALR) é uma proteína de ligação ao cálcio de 417 aminoácidos, também conhecida como CRP55, Calregulina, ERp60, HACBP e grp60, codificada pelo gene CALR em humanos.
• Funciona como uma chaperona de lectina no retículo endoplasmático (RE), interagindo transitoriamente com glicoproteínas monoglicosiladas para promover o dobramento, montagem oligomérica e controle de qualidade através do ciclo calreticulina/calnexina (PubMed:7876246). Referências relacionadas: PMID:7876246
• A Calreticulina também medeia a exportação nuclear de NR3C1 (receptor de glicocorticoide) ligando-se ao seu domínio de ligação ao DNA, influenciando a regulação transcricional (PubMed:11149926). Referências relacionadas: PMID:11149926
• Localiza-se principalmente no lúmen do RE, mas também pode ser encontrada no citosol, secretada para o espaço extracelular, associada à superfície celular e dentro de vesículas citoplasmáticas como grânulos secretores e lisossomos.
• A Calreticulina desempenha um papel na homeostase de cálcio e está envolvida na regulação da expressão de genes maternos; pode participar na maturação do oócito e no bloqueio à poliespermia após a exocitose dos grânulos corticais (Por similaridade).
• A proteína contém uma sequência de sinal, três repetições da família da calreticulina e sofre modificações pós-traducionais incluindo acetilação, hidroxilação, glicosilação e formação de ligações dissulfeto, com propriedades de ligação ao zinco e ao cálcio.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 18-203, que abrange o domínio N-terminal e parte do domínio P, conhecidos por serem altamente conservados. Este design provavelmente produz um anticorpo que reconhece formas nativas e desnaturadas, adequado para múltiplas aplicações.
• Para Western blotting (WB), espera-se uma banda principal em aproximadamente 47kDa; considere o uso de condições redutoras e valide no lisato de células ou tecidos relevante. Titre as diluições do anticorpo para obter uma relação sinal-ruído ideal.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), as etapas de fixação e permeabilização podem influenciar a coloração da calreticulina localizada no RE; a recuperação de antígeno com tampão citrato (pH 6,0) e o bloqueio com soro são comumente utilizados.
• Para ELISA, este anticorpo monoclonal pode servir como reagente de captura ou detecção; o emparelhamento com um anticorpo correspondente ou calibrador é recomendado para ensaios quantitativos.
• O status de validação por KO indica que o anticorpo reconhece especificamente a calreticulina, pois o sinal é abolido em modelos de knockout; inclua sempre controles apropriados nos setups experimentais.

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