Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Calreticulina para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P27797

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Calreticulina

• A calreticulina (também conhecida como CRP55, Calregulina, ERp60, HACBP, grp60) é uma chaperona de ligação ao cálcio altamente conservada, localizada predominantemente no lúmen do retículo endoplasmático (RE).
• Ela promove o dobramento adequado de proteínas, a montagem oligomérica e o controle de qualidade de glicoproteínas recém-sintetizadas por meio do ciclo calreticulina/calnexina, interagindo transitoriamente com substratos monoglucosilados. Referências relacionadas: PMID:7876246
• A calreticulina interage com o domínio de ligação ao DNA do receptor de glicocorticoides (NR3C1) e facilita sua exportação nuclear, relacionando-a à regulação transcricional. Referências relacionadas: PMID:11149926
• Embora seja principalmente uma proteína luminal do RE, a calreticulina também é encontrada no citosol, na superfície celular, secretada na matriz extracelular e em vesículas especializadas, como grânulos corticais e citolíticos.
• Nos oócitos, a calreticulina regula a homeostase do cálcio e é exocitada durante a liberação dos grânulos corticais, contribuindo para o bloqueio da polispermia.
• A proteína sofre acetilação, hidroxilação, formação de pontes dissulfeto e glicosilação, além de se ligar ao cálcio e ao zinco, elementos essenciais para sua integridade estrutural e função de chaperona.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 18–203 (região N-terminal) da calreticulina humana, um domínio conservado que provavelmente explica a reatividade cruzada relatada com camundongo e rato.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de 47 kDa; use concentrações adequadas de gel e confirme a eficiência da transferência por meio da coloração de proteínas totais.
• Em imuno-histoquímica e imunofluorescência, considere as etapas de recuperação antigênica e permeabilização devido à localização no RE; a localização subcelular pode variar de acordo com o tipo celular e o estado fisiológico.
• Para aplicações em ELISA, podem ser seguidos protocolos padrão de ELISA indireto; titule tanto o anticorpo primário quanto o antígeno para obter relações sinal/ruído ideais.

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