Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-CaMKI para WB e ELISA - Q14012

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CaMKI/CaMKI-alfa

• A proteína quinase dependente de cálcio/calmodulina tipo 1 (CaMKI, também conhecida como CaM quinase I alfa) é uma serina/treonina proteína quinase pertencente à família CaMK. Ela funciona a jusante da CaMKK na cascata de sinalização desencadeada pelo cálcio.
• O CaMKI é um regulador chave do desenvolvimento e função neuronal. Ele promove a extensão axonal, motilidade do cone de crescimento, crescimento dendrítico e formação de espinhas/sinapses em neurônios hipocampais. É essencial para a potenciação de longa duração (LTP) e ativação traducional dependente de ERK2 nas sinapses.
• Além do sistema nervoso, o CaMKI regula diversos processos, incluindo a progressão do ciclo celular (transição G1/S via ciclina-D1/CDK4), diferenciação de células musculares (via fosforilação de HDAC5 e exportação nuclear) e produção de hormônios (regulação da aldosterona sintase no córtex adrenal).
• A quinase fosforila inúmeros substratos, como CREB1, ATF1, CFTR, MYL9, SYN1, EIF4G3, ARHGEF7, MARK2 e NUMB, controlando assim a transcrição, endocitose e dinâmica do citoesqueleto.
• O CaMKI está localizado tanto no citoplasma quanto no núcleo, consistente com seus papéis na transdução de sinais e regulação transcricional.
• A proteína é amplamente expressa em vários tecidos, com expressão notável no córtex adrenal.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação para ativação e ubiquitinação; é uma enzima alostérica que se liga à calmodulina de maneira dependente de cálcio.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético da região N-terminal (aa 1-100), que pode ser conservado entre espécies e é provável que detecte a conformação nativa do CaMKI. Considere a pré-adsorção com o peptídeo imunizante para confirmar a especificidade.
• Para Western blotting, valide o anticorpo em lisados de tecidos ou linhagens celulares humanas, de camundongo ou de rato onde o CaMKI é expresso (por exemplo, cérebro, glândula adrenal). O peso molecular previsto é de aproximadamente 41 kDa; garanta condições ótimas de eletroforese em gel e transferência.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção. Realize titulação cruzada com o antígeno para determinar as concentrações de trabalho ideais. Inclua controles positivos e negativos apropriados.
• Como o CaMKI é ativado por cálcio/calmodulina, a estimulação das células com agentes que aumentam o Ca2+ intracelular pode aumentar a detecção em ensaios funcionais.

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