Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Anidrase Carbónica 9 (CA9/G250) para WB, ELISA - Q16790

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Anidrase Carbónica 9 (CA9/G250)

• CA9, também conhecida como CAIX, MN ou G250, é uma anidrase carbónica transmembrana que catalisa a hidratação reversível do dióxido de carbono em bicarbonato e protões, desempenhando um papel fundamental na homeostase do pH.
• A proteína localiza-se na membrana celular, particularmente na membrana de microvilosidades, e também é encontrada no núcleo e no nucléolo.
• Em tecidos normais, a expressão é altamente restrita, com os níveis mais abundantes nas células epiteliais da mucosa gástrica. No entanto, é frequentemente superexpressa em linhagens de células carcinomatosas, tornando-a um marcador tumoral associado útil.
• As modificações pós-traducionais incluem glicosilação N-ligada, fosforilação e uma ligação dissulfeto, que podem influenciar a estabilidade e a função.
• A enzima requer zinco como cofator para a atividade catalítica, característica das anidrases carbónicas alfa.
• Nomes alternativos, como anidrase carbónica IX, antígeno G250 associado ao carcinoma de células renais e p54/58N, refletem os seus papéis na fisiologia e oncologia.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio abrange os aminoácidos 52–151 no domínio extracelular. Para Western blot, considere o uso de lisados de células inteiras ou frações de membrana em condições redutoras para quebrar as ligações dissulfeto.
• As aplicações de ELISA podem requerer titulação para otimizar a relação sinal-ruído. Valide a reatividade cruzada com amostras de camundongo e rato usando controlos apropriados.
• Devido à expressão restrita em tecidos normais, a deteção em lisados de tecidos pode beneficiar de etapas de enriquecimento ou uso de linhagens de células carcinomatosas de controlo positivo.
• Para aplicações como IHC ou IF, recomenda-se a otimização, pois as conformações nativas podem mascarar o epítopo reconhecido por este anticorpo policlonal.

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