Anticorpo Policlonal Anti-Troponina I Cardíaca (TNNI3) para WB, IP, IF-P, ELISA - P19429

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Troponina I, Músculo Cardíaco

• A Troponina I (TnI) é a subunidade inibidora do complexo troponina, que regula a contração do músculo estriado conferindo sensibilidade ao cálcio à atividade ATPase da actomiosina.
• A troponina I cardíaca (cTnI) é expressa especificamente no músculo cardíaco e é um biomarcador bem estabelecido para lesão miocárdica.
• O gene TNNI3 codifica a isoforma cardíaca, e mutações neste gene estão ligadas a cardiomiopatias hereditárias, como cardiomiopatia hipertrófica e restritiva.
• Como uma proteína de ligação à actina, a cTnI liga-se à actina-tropomiosina na ausência de cálcio, inibindo a contração; a ligação de cálcio à troponina C alivia essa inibição.
• Modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação e acetilação, modulam sua função e são críticas na fisiologia e patologia cardíacas.
• A proteína compartilha domínios conservados com outras isoformas de troponina I (músculo esquelético de contração lenta e rápida), mas a extensão N-terminal é exclusiva da forma cardíaca e contém vários sítios de fosforilação.
• A cTnI localiza-se no filamento fino do sarcômero, contribuindo para a integridade estrutural e regulação dependente de cálcio dos miofibrílios cardíacos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre a cTnI humana de comprimento total (aa 1-210), sugerindo que o anticorpo reconhece a maioria da sequência da proteína. Quando usado em Western blotting, espere uma banda em torno de 24 kDa em lisados de tecido cardíaco humano, de camundongo e de rato.
• Para imunoprecipitação (IP), considere usar 1–2 µg de anticorpo por 500 µg de lisado proteico e otimize com base na abundância do alvo. Inclua controles apropriados para confirmar a especificidade.
• Em imunofluorescência de seções embebidas em parafina (IF-P), uma etapa de recuperação de antígeno induzida por calor em tampão citrato (pH 6,0) é frequentemente benéfica para expor epítopos. Teste com seções de tecido muscular cardíaco.
• Para ELISA, este anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção. Combine-o com um anticorpo monoclonal anti-cTnI para desenvolver um ensaamento sanduíche sensível; a reatividade cruzada com cTnI de camundongo e rato pode ser vantajosa para estudos pré-clínicos.
• Como o anticorpo apresenta reatividade cruzada com camundongo e rato, ele é adequado para pesquisa translacional usando modelos animais comuns. No entanto, valide sempre na espécie e matriz de amostra relevantes.

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