Anticorpo policlonal de coelho anti-CASK para WB, IF/ICC, ELISA - O14936

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da CASK

• A CASK é uma proteína periférica da membrana plasmática pertencente à família das quinases de guanilato associadas à membrana (MAGUK), também conhecida como quinase proteica serina dependente de cálcio/calmodulina ou homóloga da proteína lin-2.
• Funciona como uma quinase proteica serina/treonina Mg²⁺-independente, com múltiplos domínios e função de estruturação, fosforilando substratos como NRXN1 e contribuindo para a ancoragem de proteínas transmembranares sinápticas e o tráfego de canais iônicos. Referências relacionadas: PMID:18423203
• Desempenha um papel no desenvolvimento neural e na regulação da expressão gênica por meio da interação com o fator de transcrição TBR1, além de associar-se ao complexo LIN-10-LIN-2-LIN-7 para transportar a subunidade NR2B do receptor NMDA via KIF17 ao longo dos microtúbulos.
• Liga-se a várias proteínas da superfície celular, incluindo a proteína precursora do amiloide, neurexinas e sindecanos, e pode mediar uma ligação entre a matriz extracelular e o citoesqueleto de actina por meio de sua interação com o sindecano e a proteína 4.1 de ligação à espectrina.
• Localiza-se no núcleo, no citoplasma e na membrana celular, refletindo suas versáteis funções de estruturação e sinalização.
• É expressa ubiquitariamente, com níveis significativamente mais elevados no cérebro em comparação com rim, pulmão e fígado, e no cérebro e rim fetais em relação ao pulmão e fígado fetais.
• Contém um domínio SH3, vários módulos de interação proteína-proteína e está sujeita a splicing alternativo; é fosforilada em vários resíduos, conforme identificado por abordagens proteômicas.
• Variantes genéticas em CASK estão associadas à deficiência intelectual e a distúrbios neurológicos, ressaltando seu papel fundamental no neurodesenvolvimento.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde à região N-terminal (aa 1–300) da CASK humana; considere usar este anticorpo para detectar a CASK de comprimento total e possivelmente algumas isoformas, mas esteja ciente do possível mascaramento do epítopo em amostras fixadas.
• Para western blotting, espere uma banda em torno de 105 kDa; recomendamos incluir lisados positivos e negativos adequados para confirmar a especificidade, bem como verificar a consistência entre lotes para comparações quantitativas.
• Na imunofluorescência/ICC, a localização da CASK pode ser nuclear, citoplasmática e associada à membrana; as condições ideais de fixação e permeabilização devem ser determinadas empiricamente para o tipo celular em estudo.
• Para ELISA, teste diferentes tampões de revestimento e diluições do anticorpo; use uma proteína CASK recombinante padrão para estabelecer uma curva padrão confiável.
• Como este é um reagente policlonal, realize titulação de rotina e otimize o bloqueio para reduzir o background inespecífico em cada aplicação.

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