Anticorpo policlonal anti-Caspase-1 para WB, IF-P, ELISA - P29466

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Caspase-1

• A Caspase-1, também conhecida como convertase da interleucina-1 beta (ICE) ou p45, é uma protease tiol e um membro fundamental da família das proteases de ácido aspártico com cisteína (caspases).
• Após a ativação no complexo do inflamassoma, ela cliva proteoliticamente a pro-IL-1β e a pro-IL-18 em suas formas maduras ativas, iniciando respostas pró-inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:15326478 PMID:15498465 PMID:1574116
• Ela cliva a gasdermina-D (GSDMD) para desencadear a morte celular piroptótica, com o reconhecimento do substrato dependente de uma interface de exossítio, em vez de um sítio de clivagem de consenso estrito. Referências relacionadas: PMID:26375003 PMID:32051255 PMID:32109412 PMID:32553275
• Entre os substratos adicionais estão CASP7, que é clivada para promover o reparo da membrana plasmática durante infecções bacterianas; CGAS, que é inativada durante infecções por vírus de DNA; e SPHK2, que é liberada em células apoptóticas. Referências relacionadas: PMID:22464733 PMID:28314590 PMID:20197547
• Ela está localizada principalmente no citoplasma e associa-se à membrana celular.
• A Caspase-1 é altamente expressa no baço e nos pulmões, com níveis mais baixos no fígado, coração, intestino delgado, cólon, timo, próstata, músculo esquelético, leucócitos do sangue periférico, rim e testículos; está ausente no cérebro.
• A proteína sofre maturação autoproteolítica a partir de um zimógeno de 45 kDa e está sujeita a fosforilação, formação de ligações isopeptídicas e conjugação semelhante à ubiquitina. O splicing alternativo gera múltiplas isoformas.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região dentro da subunidade p20 da pro-caspase-1 humana, sugerindo que o anticorpo pode reconhecer tanto a proenzima completa de 45 kDa quanto seus fragmentos processados. No Western blot, considere analisar lisados de células tratadas com ativadores do inflamassoma (por exemplo, LPS/ATP) para observar a ativação da caspase-1.
• Para imunofluorescência (IF-P), valide o anticorpo em linhagens celulares ou tecidos com expressão conhecida de CASP1 (por exemplo, macrófagos THP-1 e baço) e otimize a permeabilização para detectar as frações citoplasmática e associada à membrana.
• No ELISA, use o anticorpo como reagente de captura ou detecção para a quantificação da caspase-1; confirme a reatividade contra a CASP1 humana recombinante e a reatividade cruzada com os homólogos de camundongo e rato na matriz de amostra relevante.

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