Anticorpo Policlogonal de Coelho Anti-Caspase-1 para WB, IF/ICC, ELISA - P29466

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Caspase-1

• A Caspase-1 é uma tiol protease que cliva os precursores da interleucina-1 beta (IL1B) e da interleucina 18 (IL18) nas suas formas maduras ativas, desempenhando um papel central nas respostas inflamatórias. Referências relacionadas: PMID:15326478, PMID:15498465, PMID:1574116
• Ela também inicia a piroptose, uma via de morte celular programada lítica, por meio da clivagem da Gasdermina-D (GSDMD), liberando seu domínio N-terminal para formar poros na membrana. Referências relacionadas: PMID:26375003
• A ativação da Caspase-1 ocorre dentro dos complexos do inflamassomo, que se montam em resposta a sinais associados a patógenos ou danos, levando à clivagem autocatalítica induzida por proximidade do pró-enzima.
• O splicing alternativo produz múltiplas isoformas, incluindo formas que não têm atividade proteásica, embora seus papéis fisiológicos ainda não estejam completamente caracterizados.
• Subcelularmente, a Caspase-1 encontra-se predominantemente no citoplasma, mas uma fração se associa à membrana celular, o que pode facilitar seu papel no processamento de substratos proximais à membrana.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e ubiquitinação, e a enzima é inicialmente sintetizada como um zimogênio inativo que requer clivagem proteolítica para ser ativada.
• A expressão tecidual é maior no baço e no pulmão, com detecção em fígado, coração, intestino delgado, cólon, timo, próstata, músculo esquelético, leucócitos do sangue periférico, rim e testículo, mas não no cérebro.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região central (aa 201-300) da Caspase-1 humana. Para Western blotting, o peso molecular esperado da forma pró-enzima é de cerca de 45 kDa; após a ativação, produtos de clivagem podem ser observados em tamanhos menores. Considere usar lisados celulares tratados com ativadores do inflamassomo (por exemplo, LPS/ATP) para monitorar a clivagem.
• Para imunofluorescência/imunocitoquímica, a permeabilização é necessária para detectar a Caspase-1 localizada no citoplasma e na membrana. Inclua controles apropriados e valide o padrão de coloração no contexto celular relevante.
• Este anticorpo tem reatividade cruzada prevista com camundongo e rato devido à homologia de sequência na região do imunógeno; no entanto, verifique a reatividade no seu sistema experimental específico por meio de testes preliminares.

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