Anticorpo Policlonal Anti-Caspase-3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42574

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Caspase-3

• A Caspase-3 é uma protease de tiol que atua como uma caspase efetora principal na fase de execução da apoptose. Após a ativação pelas caspases iniciadoras (CASP8, CASP9 e/ou CASP10), ela medeia a apoptose catalisando a clivagem de numerosos substratos proteicos. Referências relacionadas: PMID:18723680 PMID:20566630 PMID:23650375
• Um evento apoptótico marcante é a clivagem proteolítica da polimerase de poli(ADP-ribose) PARP1 na ligação Asp216-Gly217. A Caspase-3 também cliva e ativa caspases a jusante, como CASP6, CASP7 e CASP9, e inativa a interleucina-18 (IL18). Referências relacionadas: PMID:10497198 PMID:16374543 PMID:7596430 PMID:37993714 PMID:9334240
• Além da apoptose, a caspase-3 está envolvida na piroptose ao mediar a clivagem e ativação da gasdermina-E (GSDME), ligando-a a vias de morte celular inflamatória. Referências relacionadas: PMID:35338844 PMID:35446120
• A Caspase-3 contribui para funções não apoptóticas, incluindo a poda de axônios durante o desenvolvimento cerebral, regulação da adesão celular via RET e clivagem de proteínas desmossômicas (por exemplo, DSG2, JUP), e clivagem da huntingtina. Referências relacionadas: PMID:8696339 PMID:21357690 PMID:17559062
• Sob estresse oxidativo, a caspase-3 cliva e inibe a serina/treonina proteína quinase AKT1 e, durante a infecção viral, cliva as proteínas antivirais CGAS, IRF3 e MAVS para evitar a superprodução de citocinas. Referências relacionadas: PMID:23152800 PMID:30878284
• A proteína localiza-se predominantemente no citoplasma e é expressa em altos níveis no pulmão, baço, coração, fígado e rim, com níveis moderados no cérebro e músculo esquelético, e níveis baixos nos testículos. É mais abundante em células do sistema imunológico.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 55–160 da Caspase-3 humana, abrangendo parte do pró-domínio e da subunidade grande; considere que este anticorpo pode reconhecer tanto a pró-forma inativa quanto a forma ativa clivada.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 32 kDa, mas fragmentos de clivagem (por exemplo, ~17 kDa e ~12 kDa) podem aparecer dependendo do estado de ativação e preparação da amostra.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), valide a coloração em tecidos positivos conhecidos (por exemplo, baço, timo) e inclua controles apropriados para confirmar a especificidade.
• Dada a alta identidade de sequência entre humano, camundongo e rato, espera-se reatividade cruzada; no entanto, a diluição ideal e as condições de incubação devem ser determinadas empiricamente para cada espécie e aplicação.
• Armazene conforme recomendado (envio em saco de gelo) e evite ciclos repetidos de congelamento-descongelamento para manter a estabilidade e o desempenho do anticorpo.

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