Anticorpo monoclonal de coelho anti-Caspase-6 para WB, IF/ICC, ELISA - P55212

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Caspase-6

• A Caspase-6 (Mch-2) é uma protease cisteína-aspártica codificada pelo gene CASP6 (GeneID 839), com peso molecular de aproximadamente 33 kDa.
• Ela atua como uma caspase executora não canônica durante a apoptose: localizada no núcleo, cliva as proteínas estruturais nucleares laminina A (LMNA) e NUMA1, induzindo o encolhimento e a fragmentação nuclear. A clivagem da laminina A é especificamente necessária para a condensação da cromatina e a desmontagem nuclear. Referências relacionadas: PMID:11953316, PMID:17401638, PMID:8663580
• Após a perda da fosforilação mediada por AMPK, a caspase-6 cliva o BID, desencadeando a liberação do citocromo c e promovendo a apoptose de hepatócitos na esteatohepatite não alcoólica. Referências relacionadas: PMID:32029622
• Na via intrínseca da apoptose, a caspase-6 medeia a clivagem do RIPK1, contribuindo para o sinal apoptótico. Referências relacionadas: PMID:22858542
• Ela cliva os fatores de transcrição NF-kappa-B e CREBBP, modulando assim os programas inflamatórios e transcricionais durante a morte celular. Referências relacionadas: PMID:10559921, PMID:14657026
• Independentemente de sua atividade proteásica, a caspase-6 atua como um scaffold que facilita a PANoptose mediada por ZBP1 (piroptose, apoptose, necroptose), ao intensificar a interação entre RIPK3 e ZBP1, levando à ativação do inflamassomo. Referências relacionadas: PMID:32298652
• A caspase-6 também desempenha um papel antiviral ao clivar proteoliticamente a proteína N de coronavírus (por exemplo, MERS-CoV, SARS-CoV, SARS-CoV-2), que suprime a sinalização do interferon tipo I e aumenta a replicação viral. Referências relacionadas: PMID:18155731, PMID:35922005
• A proteína se encontra tanto no citoplasma quanto no núcleo, e sua atividade é regulada por processamento proteolítico, fosforilação e palmitoilação (lipoproteína).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo dentro dos aminoácidos 100‑200 da caspase-6 humana (P55212), que se encontra na subunidade grande p20; o anticorpo pode reconhecer tanto a pró-forma de ~33 kDa quanto o fragmento de clivagem p20.
• Para Western blotting, a banda prevista para a caspase-6 de comprimento completo é de ~33 kDa; após a ativação, fragmentos menores (~20 kDa e ~10 kDa) podem aparecer. Valide a detecção em lisados apoptóticos vs. não apoptóticos.
• Em imunofluorescência/ICC, é esperada uma coloração dupla citoplasmática-nuclear; a translocação para o núcleo pode ser um marcador de indução da apoptose. Otimize a fixação/permeabilização para uma detecção confiável.
• O anticorpo é adequado para ELISA; considere o pareamento com um segundo anticorpo que reconheça um epitopo distante para o desenvolvimento de ensaios sanduíche.
• A reatividade cruzada foi confirmada para humanos e camundongos; para outras espécies, recomenda-se o alinhamento da sequência da região do imunógeno e a validação experimental.

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