Anticorpo policlonal de coelho anti-Caspase-6 para WB, ELISA - P55212

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Caspase-6

• A Caspase-6 é uma protease de cisteína que desempenha funções essenciais na apoptose, degeneração axonal, desenvolvimento e imunidade inata. Referências relacionadas: PMID:19133298, PMID:22858542, PMID:27032039
• Ela atua como uma caspase executora não canônica durante a apoptose, localizando-se no núcleo, onde cliva as proteínas estruturais nucleares NUMA1 e lamin A/LMNA, induzindo o encolhimento e a fragmentação nuclear. Referências relacionadas: PMID:11953316, PMID:17401638, PMID:8663580
• A clivagem da lamin A/LMNA é necessária para a condensação da cromatina e a desintegração nuclear durante a execução apoptótica. Referências relacionadas: PMID:11953316
• A Caspase-6 regula a lesão hepática ao promover a apoptose dos hepatócitos; quando não é fosforilada pela AMPK, ela cliva BID, levando à liberação do citocromo c e contribuindo para a esteato-hepatite não alcoólica. Referências relacionadas: PMID:32029622
• Ela está envolvida na apoptose intrínseca ao mediar a clivagem de RIPK1 e cliva fatores de transcrição como NF-kappa-B e CREBBP. Referências relacionadas: PMID:22858542, PMID:10559921, PMID:14657026
• Além da apoptose, a Caspase-6 participa da PANoptose (piroptose, apoptose e necroptose) independentemente de sua atividade proteásica, atuando como uma estrutura de suporte para a morte celular mediada por ZBP1 durante uma infecção viral. Referências relacionadas: PMID:32298652
• Desempenha um papel essencial na degeneração axonal durante a poda do desenvolvimento (por similaridade).
• Durante uma infecção microbiana, ela cliva proteoliticamente a proteína N dos coronavírus, incluindo MERS-CoV, SARS-CoV e SARS-CoV-2, modulando a sinalização de IFN para aumentar a replicação viral. Referências relacionadas: PMID:18155731, PMID:35922005

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a uma sequência dentro da subunidade madura da caspase-6 (aa 194-293), o que pode favorecer a detecção tanto da pró-forma quanto dos fragmentos clivados ativos. Considere verificar a especificidade em lisados celulares relevantes.
• Para Western blot, pode ser observada uma banda em torno de 33kDa (pró-forma) e, possivelmente, bandas de menor peso molecular (~18kDa e ~11kDa, correspondentes às subunidades ativas), dependendo da indução da apoptose.
• Valide o desempenho do anticorpo em seu ensaio utilizando controles positivos e negativos, por exemplo, células não tratadas em comparação com células apoptóticas.
• Para ELISA, a combinação com um anticorpo de captura adequado pode melhorar a sensibilidade. Recomenda-se realizar uma titulação.
• Foi relatada reatividade cruzada com a Caspase-6 de camundongo; assegure a homologia da sequência caso o uso seja estendido a outras espécies.
• Armazene conforme recomendado durante o envio em saco de gelo; para armazenamento de longo prazo, mantenha a -20°C ou -80°C em alíquotas, evitando ciclos de congelamento e descongelamento.

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