Anticorpo policlonal de coelho anti-Caspase-8 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14790

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Caspase-8

• O gene CASP8 codifica uma tiolprotease que atua como interruptor molecular para apoptose, necroptose e piroptose, sendo essencial para a prevenção de danos teciduais durante o desenvolvimento embrionário e na vida adulta. Referências relacionadas: PMID:23516580, PMID:35338844, PMID:35446120
• Na apoptose extrínseca, a CASP8 é recrutada para receptores de morte (FAS/TNFRSF1A) por meio do adaptador FADD, formando o complexo de sinalização indutor de morte (DISC), onde sofre ativação proteolítica. Referências relacionadas: PMID:8681376, PMID:8681377, PMID:9184224
• A CASP8 ativada cliva e ativa caspases efetoras downstream (CASP3, CASP4, CASP6, CASP7, CASP9, CASP10), além de BID, ligando a sinalização do receptor de morte à via de apoptose mitocondrial. Referências relacionadas: PMID:16916640, PMID:8962078, PMID:9006941
• A CASP8 também atua como regulador negativo da necroptose, clivando RIPK1 no resíduo Asp-324, limitando a necroptose induzida por TNF e a inflamação. Referências relacionadas: PMID:31827280, PMID:31827281
• Na piroptose, a CASP8 cliva as gasderminas C e D (GSDMC, GSDMD), gerando fragmentos N-terminais formadores de poros que desencadeiam a permeabilização da membrana. Referências relacionadas: PMID:32929201, PMID:34012073
• Subcelularmente, a CASP8 se localiza no citoplasma, núcleo e projeções celulares como lamellipódios.
• As isoformas 1, 5 e 7 são amplamente expressas, com níveis mais altos em leucócitos do sangue periférico, baço, timo e fígado; isoformas alternadamente splicadas sem atividade catalítica podem atuar como inibidores dominante-negativos da cascata de caspases. Referências relacionadas: PMID:12010809

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aa 376–479) da Caspase-8 humana; tanto o comprimento completo quanto fragmentos clivados podem ser detectados em Western blot — valide os padrões de bandas no seu sistema experimental.
• Para Western blot, espere uma banda próxima a 55 kDa para o pró-enzima; bandas adicionais representando fragmentos clivados ativos podem aparecer após a indução da apoptose.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), considere a recuperação de antígeno com tampão citrato ou Tris-EDTA e otimize as condições de bloqueio para o seu tecido.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), ajuste a fixação e permeabilização para equilibrar a acessibilidade do antígeno e a preservação morfológica.
• A reatividade cruzada do anticorpo com camundongo e rato é prevista com base em dados do fabricante; realize o alinhamento de sequências para confirmar a conservação do epitopo se estiver trabalhando com outras espécies.

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