Anticorpo Policlonal Anti-Caspase-9 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P55211

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da caspase-9

• A caspase-9 é uma protease de cisteína da família das caspases que atua como caspase iniciadora na via apoptótica intrínseca.
• Ao se ligar à Apaf-1, a caspase-9 é ativada e, subsequentemente, cliva e ativa caspases efetoras, como a caspase-3 e a caspase-7, para executar a apoptose.
• A caspase-9 promove a apoptose induzida por danos ao DNA de maneira dependente de ABL1/c-Abl e cliva proteoliticamente a poli(ADP-ribose) polimerase (PARP).
• A caspase-9 cliva BIRC6 após a inibição da ligação BIRC6-caspase por DIABLO/SMAC. Referências relacionadas: PMID:36758105, PMID:36758106
• Uma isoforma alternativamente splicada, a caspase-9S, não possui atividade catalítica e atua como inibidor dominante negativo da enzima de comprimento completo.
• É expressa ubiquamente, com níveis mais elevados no coração (especificamente nos miócitos), níveis moderados no fígado, músculo esquelético e pâncreas, e níveis baixos em outros tecidos.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e conjugação de ubiquitina, regulando sua atividade; é sintetizada como um zimógeno que requer processamento proteolítico.
• Palavras-chave: Apoptose, Hidrolase, Protease, Protease tiol, Fosfoproteína, Conjugação de Ubl, Zimógeno, Splicing alternativo, Estrutura 3D.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 139-416 da caspase-9 humana, incluindo a subunidade grande; o anticorpo pode detectar tanto a proforma de comprimento completo (~46 kDa) quanto as formas processadas. Inclua marcadores apropriados de peso molecular.
• Para Western blot, considere utilizar lisados de tecido cardíaco ou hepático como controles positivos, devido à expressão relativamente alta nesses tecidos.
• Na imunohistoquímica, valide a coloração em cortes de coração ou fígado e otimize as condições de recuperação antigênica para tecidos fixados em formalina e incluídos em parafina.
• Para imunofluorescência, a caspase-9 localiza-se principalmente no citoplasma; considere a dupla coloração com marcadores mitocondriais para avaliar a ativação apoptótica.

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