Anticorpo Policlonais Anti-CASR para WB, IHC-P, ELISA - P41180

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do CASR

• O receptor de detecção de cálcio extracelular (CASR), também conhecido como receptor de detecção de cálcio de célula paratireoidiana 1 (PCaR1), é codificado pelo gene CASR (nomes alternativos: GPRC2A, PCAR1) e pertence à família dos receptores acoplados à proteína G. O splicing alternativo gera múltiplas isoformas.
• O CASR atua como um regulador chave da homeostase sistêmica do cálcio, detectando flutuações na concentração de cálcio extracelular. Na glândula paratireoide, o aumento do cálcio circulante ativa o CASR, levando à diminuição da secreção do hormônio paratireoidiano (PTH). No rim, modula a reabsorção tubular renal de cálcio. Referências relacionadas: PMID:17555508 PMID:19789209 PMID:21566075
• Após a ligação ao ligante, o CASR sofre alterações conformacionais que disparam a sinalização através de múltiplos subtipos de proteína G. Ele pode se acoplar a G(q)/G(11) para ativar a fosfolipase C-beta (gerando DAG e IP3) e a G(i)/G(o) para inibir a adenilato ciclase, sendo que a via específica depende do contexto celular. Referências relacionadas: PMID:38632411 PMID:7759551
• A ativação completa do receptor segue um mecanismo de coagonista, onde aminoácidos aromáticos (por exemplo, Trp, Phe) atuam em conjunto com cátions divalentes como cálcio ou magnésio. Referências relacionadas: PMID:27386547 PMID:27434672 PMID:32817431
• Além da detecção de cálcio, foi demonstrado que o CASR ativa o inflamassoma NLRP3 via down-regulação mediada por G(i)/G(o) do AMPc, o que remove a inibição do NLRP3. Referências relacionadas: PMID:32843625
• O receptor está predominantemente localizado na membrana celular, o que é consistente com seu papel na detecção de sinais extracelulares.
• A expressão tecidual é ampla, com detecção no lobo temporal, lobo frontal, lobo parietal, hipocampo, cerebelo, rim, pulmão, fígado, coração, músculo esquelético e placenta.
• As principais modificações pós-tradução e características estruturais incluem pontes dissulfeto, glicosilação, fosforilação e conjugação com ubiquitina, que podem influenciar o tráfego e a função do receptor. Ele contém um peptídeo sinal e sete hélices transmembrana, características dos GPCRs.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 180–536 do CASR humano, uma região do grande domínio extracelular que é crítica para a ligação ao ligante. Esse design provavelmente gera anticorpos que reconhecem o receptor nativo.
• Para Western blotting (WB), o peso molecular previsto do CASR é de aproximadamente 121 kDa. No entanto, a extensa glicosilação e outras modificações podem resultar em um peso molecular aparente maior. Valide a banda de interesse usando controles apropriados e considere experimentos de deglicosilação, se necessário.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), métodos de recuperação de antígeno podem ser necessários para desmascarar epítopos em tecidos fixados em formalina e embebidos em parafina. Otimize as condições de coloração com tecidos controles positivos e negativos.
• É esperado que o anticorpo tenha reatividade cruzada com o CASR de humano, camundongo e rato. Ao trabalhar com modelos animais, confirme a reatividade na espécie relevante testando uma amostra controle.
• Para aplicações em ELISA, a natureza policlonal desse anticorpo pode proporcionar alta sensibilidade. Ele pode ser usado como anticorpo de captura ou de detecção, mas o desempenho deve ser verificado com padrões de proteína recombinante ou nativa.

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