Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Catepsina G para WB, IHC-P, ELISA - P08311

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Catepsina G

• A catepsina G (CTSG) é uma protease serínica com especificidade semelhante à tripsina e à quimotripsina, clivando preferencialmente após Phe, Tyr, Trp e Leu na posição P1 e apresentando preferência por resíduos carregados negativamente em P2′ (PubMed:29652924, PubMed:8194606).
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• Apresenta potente atividade antimicrobiana contra bactérias Gram-negativas (N. gonorrhoeae, P. aeruginosa) e Gram-positivas (L. monocytogenes, S. aureus), bem como contra M. tuberculosis, em grande parte independentemente de sua função proteolítica (PubMed:2116408, PubMed:2117044, PubMed:1937776, PubMed:15385470).
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• A catepsina G modula a imunidade adaptativa e inata ao ligar-se e estimular células B, células T CD4⁺ e CD8⁺, além de aumentar a citotoxicidade das células NK por meio de sua atividade enzimática (PubMed:7842483, PubMed:9000539, PubMed:9536127).
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• A protease é necessária para o recrutamento e a ativação plaquetária mediados pelo receptor F2RL3/PAR4; ela também induz diretamente a agregação plaquetária, um efeito fortemente potencializado pela elastase de neutrófilos (ELANE) (PubMed:10702240, PubMed:3390156, PubMed:25211214, PubMed:9111081).
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• Ela cliva uma ampla variedade de substratos fisiológicos, incluindo o complemento C3, o receptor de trombina F2R/PAR1 (atuando como agonista ou inibidor dependendo do local), os fatores de coagulação F8 e F10, as citocinas pró-inflamatórias IL36G e IL33, e a proteína de superfície leucocitária CD43 (PubMed:1861080, PubMed:7744748, PubMed:18217133, PubMed:8920993, PubMed:30804664, PubMed:22307629, PubMed:18586676).
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• A proteína é encontrada em vários compartimentos subcelulares, incluindo os grânulos citoplasmáticos dos neutrófilos, sendo secretada no meio extracelular e também detectada na membrana celular, no citoplasma, no citosol, nos lisossomos e no núcleo.

• A expressão tecidual ocorre predominantemente em neutrófilos (no nível proteico) e, em menor grau, em células B (PubMed:3799965, PubMed:15100291).
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• A catepsina G é uma glicoproteína que contém pontes dissulfeto intramoleculares; é sintetizada como um zimógeno inativo e processada proteoliticamente para formar a enzima madura.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting (WB), espera-se que o anticorpo detecte uma banda próxima de 29 kDa correspondente à catepsina G madura; formas precursoras ou variantes com diferentes padrões de glicosilação também podem ser observadas. Recomenda-se otimizar a preparação das amostras e as concentrações de carregamento no sistema experimental específico.
• Na imunohistoquímica (IHC-P), a recuperação antigênica por métodos mediados por calor (por exemplo, tampão de citrato ou EDTA, pH 6,0 ou 9,0) pode melhorar a coloração. Valide o anticorpo em tecidos de controle positivo reconhecidamente expressos para catepsina G (por exemplo, tonsila humana e baço), juntamente com controles negativos.
• Para ELISA, a natureza policlonal pode proporcionar alta sensibilidade, mas é essencial avaliar a consistência entre lotes e a possível reatividade cruzada. A combinação com um anticorpo de captura adequado ou seu uso como reagente de detecção são estratégias viáveis.
• O imunógeno está localizado no domínio catalítico (aa 75–190), sugerindo que o anticorpo provavelmente reconhece tanto a enzima precursora quanto a madura; portanto, deve-se ter cuidado ao interpretar dados de sistemas nos quais a pro-catepsina G é abundante.

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