Anticorpo Policlonal Anti-Catepsina K (CTSK) para WB e ELISA - P43235

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Catepsina K

• A Catepsina K (CTSK), também conhecida como catepsina O, O2 ou X, é uma cisteína protease lisossomal da família papaína, sintetizada como um zimogênio inativo que sofre ativação proteolítica.
• Desempenha um papel crítico na reabsorção óssea osteoclástica ao degradar proteínas da matriz óssea, incluindo o colágeno tipo I, e é essencial para a remodelação óssea normal.
• A CTSK exibe potente atividade endoprotease contra o fibrinogênio em pH ácido, sugerindo um papel na degradação da matriz extracelular além do osso.
• Na tireoide, a CTSK está envolvida na liberação do hormônio tireoidiano tiroxina (T4) através de proteólise limitada da tireoglobulina no lúmen do folículo tireoidiano (PubMed:11082042). Referências relacionadas: PMID:11082042
• A proteína é predominantemente expressa em osteoclastos (PubMed:7805878) e células epiteliais tireoidianas (PubMed:11082042). Referências relacionadas: PMID:7805878, PMID:11082042
• A nível subcelular, a CTSK localiza-se nos lisossomos, é secretada para o espaço extracelular e pode associar-se à membrana celular apical em células polarizadas.
• Modificações pós-traducionais incluem glicosilação e formação de ligações dissulfeto, que são importantes para a estabilidade e atividade; a enzima madura é uma glicoproteína.
• Mutações no CTSK estão associadas à picnodisostose, uma displasia esquelética autossômica recessiva caracterizada por ossos densos (osteoesclerose).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Visto que o imunógeno foi gerado contra um fragmento recombinante (aa 115-329) que abrange o domínio catalítico maduro, espera-se que o anticorpo reconheça tanto a pró-forma quanto a CTSK madura ativa em condições de Western blot (WB) desnaturante; no entanto, a detecção da proteína endógena pode exigir otimização dependendo dos níveis de expressão tecidual.
• Para análise por Western blot, considere o uso de condições redutoras e inclua inibidores de proteases durante o preparo da amostra para evitar a degradação da CTSK. O peso molecular previsto da pró-enzima é de ~37 kDa, mas as formas clivadas maduras podem aparecer menores.
• A reatividade cruzada relatada com camundongo sugere utilidade para estudos de translação usando modelos de metabolismo ósseo em camundongos. Valide a reatividade cruzada em seu sistema experimental específico.
• Para ELISA, considere emparelhar este anticorpo com um anticorpo de captura ou conjugá-lo diretamente para detecção; note que, sendo um policlonal, a consistência entre lotes deve ser verificada.
• Condições de tampão ácido podem melhorar a interação anticorpo-antígeno para aplicações como imuno-histoquímica ou ensaios de atividade enzimática, dado o pH ótimo ácido da CTSK.

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