Anticorpo Monoclonal Anti-Catepsina L para WB, IHC-P, ELISA - P07711

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Catepsina L

• A Procatepsina L (Catepsina L1/MEP) é uma protease de tiol lisossomal que desempenha um papel central na degradação de proteínas, processamento de antígenos e remodelação óssea (Provável).
• O início alternativo da tradução produz isoformas nucleares que clivam o fator de transcrição CUX1, regulando a progressão do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:15099520
• Na tireoide, solubiliza a tireoglobulina para a liberação do hormônio T4; nas células neuroendócrinas, processa a proencefalina em encefalina.
• A catepsina L secretada gera endostatina a partir do colágeno XVIII e, como elastase, degrada a matriz extracelular na inflamação. Referências relacionadas: PMID:10716919
• Facilita a entrada do SARS-CoV, SARS-CoV-2 e outros vírus ativando proteoliticamente as glicoproteínas spike nos lisossomos. Referências relacionadas: PMID:32142651, PMID:16339146, PMID:18562523
• Subcelularmente, é encontrada em lisossomos, vesículas secretoras, membrana celular apical, espaço extracelular e núcleo; ativa como enzima madura após a remoção proteolítica do pró-peptídeo.
• Pertence à família da papaína (C1) de cisteína proteases; é uma glicoproteína com ligações dissulfeto, sintetizada como um zimogênio e ativada por pH baixo ou outras proteases.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 100–200) está localizado na região N-terminal da procatepsina L humana; o epítopo pode estar experto tanto na pró-enzima quanto na enzima madura, mas os utilizadores devem confirmar a especificidade para a forma desejada.
• Para Western blot, a banda principal é esperada em ~38 kDa (procatepsina L); em condições redutoras, a cadeia pesada madura (~25 kDa) também pode ser detetada. Otimize as condições de carregamento e lise para minimizar a autólise.
• Em IHC-P, use recuperação de antígeno induzida por calor (por exemplo, tampão citrato pH 6,0) e valide com tecidos positivos conhecidos por expressar catepsina L (por exemplo, fígado, placenta). Inclua o controle de isotipo.
• Para ELISA, considere o emparelhamento com um anticorpo monoclonal ou policlonal diferente para o alvo para construir um ensaio sanduíche e valide a linearidade e a recuperação na sua matriz.

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