Anticorpo Policlonais Anti-Catepsina L/V/K/H para WB, IF/ICC, ELISA - P07711

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Catepsina L

• Procatapsina L (Catepsina L1) é uma protease cisteínica lisossomal codificada pelo gene CTSL, também conhecida como proteína excretada majoritária (MEP). A iniciação alternativa da tradução produz isoformas com ou sem peptídeo sinal, levando à localização nuclear ou lisossomal.
• Atua como uma tiolproteína crítica para a degradação geral de proteínas nos lisossomos, processamento de antígenos, remodelação óssea e liberação de hormônios tireoidianos por meio da proteólise da tireoglobulina.
• Extracelularmente, atua como a principal enzima degradadora de elastina em pH neutro e gera endostatina a partir da COL18A1, contribuindo para a remodelação da matriz extracelular durante a inflamação. Referências relacionadas: PMID:10716919
• Facilita a entrada de coronavírus (SARS-CoV, SARS-CoV-2) e ebolavírus nas células hospedeiras, ativando proteoliticamente as glicoproteínas do envelope viral nos lisossomos por uma via lenta ativada por ácido. Referências relacionadas: PMID:16339146 PMID:18562523 PMID:32142651 PMID:16081529 PMID:26953343
• Regula a progressão do ciclo celular por processamento proteolítico do fator de transcrição CUX1; isoformas nucleares sem o peptídeo sinal clivam o CUX1 para modular a expressão gênica. Referências relacionadas: PMID:15099520
• A localização subcelular inclui lisossomos, membranas celulares apicais, vesículas secretoras (grânulos cromafins) e o espaço extracelular; também é encontrada no núcleo quando traduzida a partir de sítios de início de tradução downstream.
• É modificada pós-traducionalmente por glicosilação e formação de pontes dissulfeto; sintetizada como um zimogênio inativo que é processado proteoliticamente para formar a enzima ativa madura.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado corresponde aos aminoácidos 114-333 da Catepsina L humana, uma região dentro do domínio da protease madura, o que pode contribuir para a reatividade cruzada com ortólogos de camundongo e rato.
• Para Western blotting (WB), o peso molecular previsto da pró-forma é de aproximadamente 38 kDa; no entanto, as formas maduras processadas podem ter tamanho menor. Inclua inibidores de protease apropriados durante a preparação da amostra.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), considere as condições de permeabilização para detectar as frações lisossomais ou nucleares, e valide a localização com marcadores de organelas.
• Aplicações de ELISA podem exigir otimização das condições de revestimento e da diluição do anticorpo; use proteína recombinante ou padrões de peptídeo como controle positivo.
• Devido à iniciação alternativa da tradução, múltiplas isoformas podem estar presentes; verifique os padrões de bandas no seu sistema celular ou tecidual usando controles apropriados.

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