Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Catepsina L/V/K/H para WB, IHC-P, ELISA - P07711/O60911/P43235/P09668

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Catepsina L

• Procatepsina L (Catepsina L1), também conhecida como proteína majoritariamente excretada (MEP), é uma protease cisteína lisossômica codificada pelo gene CTSL. Pertence à família de peptidases C1 e compartilha alta homologia com as catepsinas V, K e H.
• Como uma protease de tiol, a catepsina L é essencial para a renovação geral de proteínas dentro dos lisossomos. Participa de diversos processos, incluindo o processamento de antígenos em células epiteliais tímicas, remodelação óssea e a liberação proteolítica do hormônio tireoidiano tiroxina a partir da tireoglobulina.
• A catepsina L degrada elastina em pH neutro e se acumula no espaço extracelular de células apresentadoras de antígenos, contribuindo para a remodelação da matriz extracelular durante a inflamação. Também gera o inibidor de angiogênese endostatina a partir do colágeno XVIII. Referências relacionadas: PMID:10716919
• Em células que não possuem TMPRSS2, a catepsina L facilita a entrada de SARS-CoV, SARS-CoV-2 e outros coronavírus clivando glicoproteínas spike dentro dos lisossomos, permitindo a fusão de membranas. Referências relacionadas: PMID:16339146
  PMID:18562523
  PMID:32142651
  PMID:16081529
  PMID:26953343
• O início alternativo da tradução produz isoformas que carecem do peptídeo sinal, as quais se localizam no núcleo e clivam o fator de transcrição CUX1, modulando assim a progressão do ciclo celular. Referências relacionadas: PMID:15099520
• A catepsina L é localizada principalmente nos lisossomos, mas também pode ser encontrada na membrana celular apical, em vesículas secretoras (por exemplo, grânulos cromafins), no espaço extracelular e no núcleo sob certas condições.
• Modificações pós-traducionais principais incluem glicosilação e formação de pontes dissulfeto. A enzima é sintetizada como um zimogênio inativo (procatepsina L) e ativada por clivagem proteolítica. Sua forma madura migra em aproximadamente 38 kDa em SDS-PAGE, enquanto o precursor de comprimento total tem cerca de 37,6 kDa.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético da região conservada (aa 50–150) da catepsina L humana, o que provavelmente explica a reatividade cruzada com as catepsinas V, K e H. Ao interpretar os resultados, considere a possível detecção de múltiplos membros da família.
• Para western blotting, espera-se uma banda próxima a 38 kDa em condições redutoras. Note que a procatepsina L (~37,5 kDa) e suas formas processadas também podem estar visíveis, dependendo da preparação da amostra e do contexto celular.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), métodos de recuperação de antígeno podem ser necessários para desmascarar epítopos em tecidos fixados em formol. A otimização das condições de recuperação (por exemplo, tampão citrato vs. EDTA, pH e aquecimento) é recomendada.
• Para ELISA, este anticorpo pode ser adequado como reagente de captura ou detecção. Valide na matriz de amostra apropriada (por exemplo, lisados celulares, extratos teciduais ou fluidos biológicos) e confirme a especificidade com controles de proteína recombinante.
• Dada sua expressão em uma ampla gama de tecidos e tipos celulares, incluindo células imunes e epitélios, inclua controles positivos e negativos apropriados. Para estudos envolvendo entrada viral, note que a catepsina L atua em compartimentos ácidos; inibidores como leupeptina ou E-64 podem ser usados para confirmar a especificidade.

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